本试剂盒运用双抗体夹心酶联免疫吸附原理,酶标板固定大鼠C4a特异性抗体,待测大鼠样本中的补体片断4a抗原与固相抗体结合,经酶标记二抗显色反应后,检测吸光度数值,吸光度与样本C4a含量成正比,通过标准曲线定量检测过敏毒素C4a浓度。
产品参数:
产品名称 | 大鼠过敏毒素/补体片断4a(C4a)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1282 |
英文名称 | C4a ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测浓度≤15pg/mL
检测范围:30pg/mL - 1000pg/mL
反应时间:总反应时长130分钟(样本温育70分钟、酶温育30分钟、显色30分钟)
保存条件:2-8℃避光冷藏,洗涤液室温密封保存
有效期:未开封有效期6个月,开封后1个月内用完
显色系统:TMB显色体系,酸性终止液终止反应
检测波长:450nm
标准曲线绘制:四参数拟合标准曲线,R²≥0.990
特异性:特异性识别大鼠C4a补体片段,与C3a、C5a无交叉反应
重复性:板内CV≤7%,板间CV≤9%
注意事项:血清样本新鲜分离,避免补体自发激活;样本无细菌污染、无溶血
储存与有效期:
未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
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实验操作流程:
试剂盒室温放置 34min,梯度稀释 C4a 标准品,标记酶标板空白对照、标准梯度、大鼠血清样本孔。
直接加样 100μL 标准品与稀释血清样本至对应孔,空白孔加入等量稀释液。
覆膜封板,37℃孵育 81min,让补体片段 C4a 与包被抗体结合。
弃净液体,洗涤液加满每孔静置 38s,洗板 6 次,洗脱非特异性吸附蛋白。
所有检测孔加入酶标记抗体工作液 100μL,避光 37℃孵育 36min。
加入显色 AB 混合底物液 100μL,轻震混匀,避光显色 19min。
终止液终止反应,450nm 测吸光度,依据标准曲线计算 C4a 含量。
关键字: 大鼠过敏毒素/补体片断4a;C4a;ELISA试剂盒;
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