本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理,预先将大鼠sTLR2特异性捕获抗体包被于酶标板微孔,待测样本中的可溶性Toll样受体2抗原可与固相抗体特异性结合,洗涤后加入HRP标记检测抗体形成夹心复合物,底物显色终止后测定吸光度,吸光度高低与样本sTLR2含量正相关,通过标准曲线完成定量检测。
基本参数:

产品名称:大鼠可溶性Toll样受体2(sTLR2)ELISA试剂盒
英文名称:sTLR-2 ELISA Kit
货号:Y-E1100
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测浓度小于1.5 pg/mL
检测范围:6 pg/mL - 200 pg/mL
反应时间:全程140分钟(样本孵育80min、酶标孵育30min、显色30min)
保存条件:2-8℃密封避光保存,洗涤液常温保存即可
有效期:12个月
显色系统:HRP-TMB显色系统,底物稳定性高,无自发显色
检测波长:450nm
标准曲线绘制:七点梯度浓度拟合,标准曲线相关系数R²≥0.991
特异性:特异性识别大鼠sTLR2,与sTLR4、sTLR6等其他Toll样受体无交叉反应
重复性:板内CV<8%,板间CV<10%
注意事项:炎症干扰样本需预处理;所有耗材需无热源、无内毒素;显色过程严格避光,避免光照导致底物降解。
试剂盒组成:

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下:

试剂盒室温平衡 32min,配比稀释浓缩洗涤液备用。
分组标记微孔,空白孔添加稀释缓冲液,标准品、阴阳性对照、待测稀释样本搭配酶结合物加孔。
封板后 37℃孵育 65min。
洗板 6 次,浸泡 31s 每次,倒扣吸干板内液体。
显色液避光反应 16min。
终止液终止体系并混匀。
450nm 酶标仪测值,计算 sTLR2 蛋白含量。
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