本试剂盒运用双抗体夹心ELISA原理,酶标板固相包被大鼠sRANKL捕获抗体,待测样本中的sRANKL抗原可与固相抗体特异性结合,洗涤后加入HRP标记检测抗体形成稳定免疫夹心结构,酶促显色终止后测定吸光度,吸光度高低对应样本sRANKL含量,结合标准曲线完成定量检测。
基本参数:

产品名称:大鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)ELISA试剂盒
英文名称:sRANKL ELISA Kit
货号:Y-E1608
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测浓度小于1.0 pg/mL
检测范围:4 pg/mL - 120 pg/mL
反应时间:全程120分钟(样本孵育60min、酶标孵育30min、显色30min)
保存条件:2-8℃密封避光保存,浓缩洗涤液室温保存
有效期:12个月
显色系统:HRP介导TMB显色,产物稳定,读数误差小
检测波长:450nm
标准曲线绘制:七点梯度稀释拟合曲线,R²≥0.991
特异性:专一结合大鼠sRANKL,与OPG、RANK等同源蛋白无交叉反应
重复性:板内CV<7.5%,板间CV<9.5%
注意事项:骨代谢相关样本需去除杂质干扰;洗板操作轻柔,避免孔底包被膜损伤;标准品稀释需精准,避免浓度偏差。
关键注意事项:

本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
实验步骤如下:

试剂盒室温静置 30min,按比例稀释洗涤浓缩液。
酶标板设置空白、标准、阴阳性对照、样本孔,对应加入稀释样品与酶结合工作液。
封板膜封口,37℃恒温孵育 60min。
洗板 5 次,每孔浸泡 30s,弃液后拍干微孔水分。
显色底物避光显色 15min。
加入终止液终止显色体系。
酶标仪 450nm 测定 OD 值,换算 sRANKL 浓度。
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