本试剂盒采用间接ELISA检测原理,酶标板微孔包被大鼠黑色素细胞特异性抗原,待测大鼠样本中的MC Ab可与固相抗原特异性结合,洗板后加入酶标记抗大鼠抗体,催化底物显色,吸光度与样本中黑色素细胞抗体含量正相关,通过标准曲线完成定量检测。
产品参数:
产品名称 | 大鼠黑色素细胞抗体(MC Ab)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1280 |
英文名称 | MC Ab ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测滴度≤1:20,最低蛋白浓度≤0.1U/mL
检测范围:0.2U/mL~10U/mL
反应时间:总时长110min,样本孵育80min,显色20min,读数5min
保存条件:2~8℃避光冷藏,抗体试剂严禁室温久置
有效期:未开封6个月,开封后1个月内用完
显色系统:HRP标记抗体介导TMB显色系统
检测波长:450nm,630nm校准
标准曲线绘制:以标准抗体浓度为横坐标,OD值为纵坐标,四参数拟合,R²≥0.990
特异性:特异性识别大鼠黑色素细胞抗体,与其他皮肤组织抗体无交叉反应
重复性:板内CV≤8%,板间CV≤10%
注意事项:血清样本需无溶血、无脂血;孵育需保持湿度,防止孔板干孔;不同批次样本统一实验条件。
关键注意事项:
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
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实验操作流程:
试剂盒室温平衡 30min,稀释 MC Ab 阳性标准品建立梯度滴度,标记酶标板各检测孔。
一步法直接上样,标准孔加梯度标准品 100μL,待测孔加大鼠血清稀释样本 100μL,空白孔加稀释液。
密闭封板,37℃孵育 70min,让血清内黑色素细胞抗体与固相抗原结合。
弃净液体,洗涤液加满每孔静置 33s,洗板 5 次,吸水纸拍干孔内余液。
除去空白孔,加入羊抗大鼠酶标二抗 100μL,避光 37℃孵育 28min。
加入 TMB 显色混合液 100μL,轻震混匀,37℃避光显色 14min。
终止液终止反应,15min 内 450nm 测 OD 值,判定 MC Ab 抗体水平。
关键字: 大鼠黑色素细胞抗体;MC Ab;ELISA试剂盒;
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