本试剂盒运用双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理,构建大鼠CYP450特异性检测体系。酶标板微孔固定CYP450捕获抗体,样本中的CYP450抗原与固相抗体特异性结合,洗涤去除游离杂质后,加入酶标记检测抗体形成夹心复合物。底物显色后,显色强度与样本中CYP450浓度成正比,结合标准曲线的定量关系,可准确检测大鼠样本中CYP450的含量。
基本参数:

产品名称:大鼠细胞色素P450(CYP450)ELISA试剂盒
英文名称:CYP450 ELISA Kit
货号:Y-E1123
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测浓度≤0.4ng/mL
检测范围:0.8ng/mL - 35ng/mL
反应时间:全程130分钟,孵育70分钟,酶孵育40分钟,显色20分钟
保存条件:2-8℃冷藏避光,核心试剂禁止冷冻、暴晒
有效期:原装有效期9个月,开封后20天内完成检测
特异性:广谱特异性识别大鼠总CYP450,与亚型特异性抗体无交叉干扰
重复性:板内CV≤5%,板间CV≤7%
注意事项:肝组织匀浆样本需充分离心去杂质;避免药物残留样本,外源药物会干扰CYP450检测。
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

板条室温放置 29min,梯度稀释 CYP450 标准品,肝组织匀浆上清稀释上样,空白孔补稀释液,每孔 50μL。
直接加入酶标抗体 50μL,封板封口,37℃孵育 76min。
洗板 6 次,每轮洗液浸泡 37s,彻底去除游离标记物。
显色底物 A、B 各 50μL 添加,避光显色 22min。
加入终止液 50μL 混匀终止反应。
酶标仪 450nm 测定吸光度并记录。
拟合标准曲线,折算稀释倍数计算 CYP450 含量。
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