本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法,酶标板固定大鼠ACV-A特异性抗体,样本中的活化素A抗原与固相抗体特异性结合,结合酶标记检测抗体后催化底物显色,吸光度与ACV-A浓度正相关,通过标准曲线完成精准定量。
产品参数:
产品名称 | 大鼠活化素A(ACV-A)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1670 |
英文名称 | ACV-A ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测浓度≤0.06ng/mL
检测范围:0.12ng/mL~9ng/mL
反应时间:总时长105min,孵育75min,显色20min,读数5min
保存条件:2~8℃避光冷藏,密封完好,防止试剂挥发、失活
有效期:未开封6个月,开封后1个月内有效
显色系统:细胞因子专用TMB高灵敏显色系统
检测波长:450nm检测波长
标准曲线绘制:梯度标准品拟合,四参数回归,R²≥0.991
特异性:特异性识别大鼠活化素A,与活化素B、抑制素无交叉反应
重复性:板内CV≤7%,板间CV≤9%
注意事项:样本避免高温、反复冻融;孵育温度恒定37℃;显色避光,终止后立即读数。
关键注意事项:
本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
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实验操作流程:
试剂盒组分室温平衡 32min,梯度稀释 ACV-A 标准品,标记酶标板标准孔、大鼠卵巢细胞上清待测孔。
直接加样:标准孔加梯度标准液 100μL,待测孔加稀释细胞上清 100μL,空白孔添加稀释缓冲液。
覆膜封板,37℃孵育 77min,完成活化素 A 抗原与固相抗体结合。
倾倒孔内液体,洗涤液浸润每孔 35s,循环洗板 5 次,彻底洗去未结合组分。
所有检测孔加入酶标记检测抗体 100μL,避光 37℃孵育 31min。
分加显色 A、B 液各 50μL,轻柔震荡混匀,避光显色 16min。
滴加终止液终止显色,酶标仪 450nm 读取吸光度,计算 ACV-A 浓度。
关键字: 大鼠活化素A;ACV-A;ELISA试剂盒;
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