本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理,酶标板包被大鼠MMP-1特异性抗体,待测大鼠样本中的基质金属蛋白酶1抗原与抗体特异性结合,结合酶标记二抗后显色,终止后读取吸光度,对照标准曲线定量MMP-1蛋白含量。
产品参数:
产品名称 | 大鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1506 |
英文名称 | MMP-1 ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测浓度≤0.05ng/mL
检测范围:0.1ng/mL~12ng/mL
反应时间:总时长105min,孵育75min,显色20min,读数5min
保存条件:2~8℃避光冷藏,蛋白酶试剂单独密封保存
有效期:未开封6个月,开封后1个月内有效
显色系统:蛋白酶专用高灵敏TMB显色系统
检测波长:450nm主波长检测
标准曲线绘制:多梯度标准品拟合,四参数回归,R²≥0.992
特异性:特异性识别大鼠MMP-1,与MMP-2、MMP-3等亚型无交叉反应
重复性:板内CV≤6%,板间CV≤8%
注意事项:样本需添加蛋白酶抑制剂,防止MMP-1降解;全程低温操作;洗涤充分,降低背景干扰。
关键注意事项:
本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
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实验操作流程:
试剂盒室温平衡 30min,复溶 MMP-1 冻干标准品梯度稀释,标记酶标板标准孔、大鼠皮肤组织上清待测孔。
一步法直接加样 100μL 梯度标准品与稀释待测样本至对应孔,空白孔加入样本稀释液。
密封酶标板,37℃孵育 78min,捕获基质金属蛋白酶 1 抗原。
弃液后洗涤液注满每孔 36s,循环洗板 5 次,拍干板底洗涤残留。
所有检测孔加入酶联抗体工作液 100μL,避光封板孵育 34min。
加入显色底物混合液 100μL,避光摇匀,37℃显色 17min。
终止液终止酶促反应,15min 内 450nm 测 OD 值,依据标准曲线计算 MMP-1 浓度。
关键字: 大鼠基质金属蛋白酶1;MMP-1;ELISA试剂盒;
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