本试剂盒运用双抗体夹心ELISA技术原理,酶标板微孔包被大鼠TrxR特异性抗体,加入标准品和待测大鼠样本,样本中的TrxR抗原与固相抗体特异性免疫结合,洗板后加入酶标记检测抗体形成免疫复合物,经底物显色、终止检测后,通过吸光度数值对照标准曲线,精准测定大鼠样本中TrxR的浓度。
基本参数:

产品名称:大鼠硫氧还蛋白还原酶(TrxR)ELISA试剂盒
英文名称:TrxR ELISA Kit
货号:Y-E1137
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测浓度≤0.05U/mL
检测范围:0.1U/mL - 5U/mL
反应时间:总反应时长125min
保存条件:2-8℃低温避光保存,酶类试剂稳定性弱,禁止反复冻融
有效期:未开封有效期6个月
显色系统:高灵敏度TMB酶促显色系统
检测波长:450nm、630nm双波长检测
标准曲线绘制:梯度酶标准品测值,四参数拟合曲线,定量检测酶活性
特异性:特异性结合大鼠TrxR,与硫氧还蛋白、其他还原酶无交叉反应
重复性:板内CV<7%,板间CV<9%
注意事项:样本低温采集处理,保持酶活性;实验无氧化污染,避免酶失活;显色时间严格统一
试剂盒组成:

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下:

微孔板分孔加标准品稀释液 50μL、待测组织匀浆样本 50μL,空白孔仅稀释液。
每孔添加酶标记检测液 100μL,封板膜密封,37℃孵育 63min。
洗板液加满每孔静置 26s,弃液拍干,重复洗板 5 次。
避光加入显色底物 AB 液各 50μL,轻震微孔板,避光显色 15min。
每孔加入终止液 50μL 终止显色,充分混匀孔内液体。
酶标仪 450nm 检测吸光度,去除空白背景干扰。
标准曲线拟合计算 TrxR 酶蛋白浓度,异常样本舍弃复测。
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