本试剂盒依托双抗体夹心酶联免疫吸附原理,以包被在酶标板的大鼠Trx特异性抗体为固相,结合样本与标准品中的Trx抗原,再加入酶标记抗体构建夹心免疫结构,洗涤去除非特异性结合成分后进行底物显色反应,通过检测吸光度,结合标准曲线线性关系,定量检测大鼠样本中Trx的表达水平。
基本参数:

产品名称:大鼠硫氧化还原蛋白(Trx)ELISA试剂盒
英文名称:Trx ELISA Kit
货号:Y-E1138
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测浓度≤0.08ng/mL
检测范围:0.2ng/mL - 8ng/mL
反应时间:总反应时长120min
保存条件:2-8℃避光保存,剩余试剂密封存放,防止挥发污染
有效期:未开封有效期6个月
显色系统:TMB底物显色,硫酸终止液终止
检测波长:450nm单波长检测
标准曲线绘制:6点梯度标准浓度,OD值拟合标准曲线,R²≥0.995
特异性:特异性识别大鼠Trx蛋白,同源物种交叉反应率低,无杂蛋白干扰
重复性:板内CV<8%,板间CV<10%
注意事项:样本避免氧化降解,全程低温操作;洗涤步骤规范,降低背景值;读数及时,避免数值衰减
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

包被微孔板每孔加入标准品梯度溶液 53μL,待测生物样本 53μL,标注组别与孔位。
直接加入酶结合物工作液 97μL,封板后 37℃避光孵育 56min。
废液倒掉,洗涤液浸泡每孔 33s,拍干残留液体,洗板 4 次。
避光滴加显色 A、B 液各 50μL,混匀后暗处显色 13min。
终止液每孔加 50μL,终止酶促反应,晃动板体混匀。
板底擦拭干净后,酶标仪 450nm 测定 OD 吸光值。
代入标准曲线公式计算样本 Trx 含量,平行样本取平均值。
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关键字: 大鼠硫氧化还原蛋白;Trx;ELISA试剂盒;
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