本试剂盒采用经典双抗体夹心ELISA原理,酶标板微孔固定抗大鼠IgG特异性抗体,待测大鼠样本中的IgG抗原与固相抗体结合,再加入辣根过氧化物酶标记的二抗形成免疫复合物,催化底物产生显色反应,通过检测吸光度、对照标准曲线,定量检测样本中IgG的表达水平。
基本参数:

产品名称:大鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒
英文名称:IgG ELISA Kit
货号:Y-E1446
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测浓度≤0.3μg/mL
检测范围:1μg/mL - 50μg/mL
反应时间:总反应时长110min
保存条件:2-8℃避光保存,所有试剂禁止冷冻,开封后密封保存
有效期:未开封有效期6个月
显色系统:经典TMB显色体系,显色快速均匀
检测波长:450nm单波长检测
标准曲线绘制:梯度IgG标准品测值,拟合标准曲线,计算样本浓度
特异性:特异性识别大鼠IgG亚型,与其他免疫球蛋白无交叉反应
重复性:板内CV<8%,板间CV<10%
注意事项:血清样本离心彻底,无纤维蛋白残留;试剂平衡至室温后再使用;温育温度严格37℃
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

预包被板每孔上样标准品稀释液 47μL,大鼠外周血血清样本 47μL,设置空白孔。
每孔加入 HRP 标记抗体液 104μL,覆膜密封,37℃孵育 64min。
废液排空,洗涤液注满微孔静置 23s,拍干,洗板 4 次。
避光滴加显色 A、B 液各 50μL,轻微晃动,暗处显色 15min。
加入终止液 50μL 终止反应,横向晃动微孔板混匀液体。
酶标仪 450nm 测定吸光度,记录所有孔位数据。
标准曲线换算 IgG 浓度,样本浓度超出范围稀释后复测。
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