大鼠苗条素受体(LR/Ob-R)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板包被大鼠LR/Ob-R特异性抗体，加入待测大鼠样本及梯度标准品，样本中的LR/Ob-R抗原与固相抗体特异性免疫结合，洗除游离成分后加入酶标抗体形成复合物，经显色检测后，通过标准曲线定量分析样本中LR/Ob-R的含量。
基本参数‌：

产品名称：大鼠苗条素受体(LR/Ob-R)ELISA试剂盒

英文名称：LR/Ob-R ELISA Kit
货号：Y-E1495

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度≤0.1ng/mL

检测范围：0.25ng/mL - 9ng/mL

反应时间：总反应时长130min

保存条件：2-8℃避光保存，受体蛋白试剂稳定性差，禁止冻融

有效期：未开封有效期6个月

显色系统：高灵敏度TMB显色体系

检测波长：450nm、620nm双波长校正

标准曲线绘制：6点梯度标准曲线，四参数拟合，R²≥0.99

特异性：特异性识别大鼠LR/Ob-R，与瘦素、其他激素受体无交叉反应

重复性：板内CV＜7.5%，板间CV＜9.5%

注意事项：组织样本充分匀浆、离心，提取上清；全程低温操作，保护受体蛋白结构；洗涤彻底，减少非特异性结合
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

包被微孔板每孔加标准品溶液 50μL，大鼠组织裂解样本 50μL，空白孔补稀释液。

每孔加入酶标检测工作液 102μL，封板避光，37℃孵育 67min。

倾倒废液，洗涤液浸泡 25s，拍干残留液体，洗板 4 次。

避光加入显色底物 A、B 各 50μL，轻震微孔板，显色 18min。

终止液 50μL 加入每孔，终止酶促显色反应并混匀。

酶标仪 450nm 检测吸光度，扣除空白对照数值。

绘制标准曲线计算 LR 受体蛋白浓度，偏离过大数据作废重测。
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