本试剂盒采用高特异性双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理,酶标板预先包被大鼠AFP特异性捕获抗体,可特异性结合样本中的甲胎蛋白抗原。加入标准品及待测样本孵育后,抗原与固相抗体特异性结合,洗板去除游离物质,再加入辣根过氧化物酶标记的AFP检测抗体,形成免疫复合物。经底物显色、终止反应后检测450nm吸光度,依据标准曲线可精准定量大鼠样本中AFP的含量。
产品参数:
产品名称 | 大鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1353 |
英文名称 | AFP ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测浓度≤0.5ng/mL
检测范围:1ng/mL - 200ng/mL
反应时间:总反应时长100min(快速孵育70min、显色30min)
保存条件:2-8℃避光保存,标准品复溶后4℃短期保存
有效期:未开封12个月
显色系统:高灵敏TMB临床检测专用显色系统
检测波长:450nm
标准曲线绘制:梯度标准品检测,四参数拟合曲线,R²≥0.995
特异性:特异性识别大鼠AFP,与血清其他球蛋白无交叉反应
重复性:板内CV≤5%,板间CV≤7%
注意事项:血清样本需彻底分离,避免纤维蛋白残留干扰检测
关键注意事项:
本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
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实验操作流程:
试剂室温复温 26min,配制洗涤液,溶解 AFP 标准品并梯度稀释,取出酶标板条。
标准孔加梯度标品 50μL,血清样本孔直接上样稀释后样本 50μL,空白孔加稀释液。
全孔加入酶结合工作液 100μL,覆膜封口,37℃孵育 55min。
洗板 4 次,洗液浸泡 26s,弃液拍干微孔残留液体。
避光加入显色 A、B 液各 50μL,37℃避光显色 13min。
终止液 50μL 加入混匀终止。
450nm 测 OD 值,计算大鼠 AFP 浓度。
关键字: 大鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白;AFP;ELISA试剂盒;
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