本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理,通过将人碱性胎儿蛋白特异性单克隆抗体包被于微孔板,捕获待测样本中的BFP抗原;孵育洗涤后加入酶标记抗BFP抗体,形成固相抗体-抗原-酶标抗体的特异性复合物,洗去未结合的酶标抗体后,加入底物液进行显色反应,有色产物的吸光度值与样本中碱性胎儿蛋白含量呈正比例关系,结合标准曲线可精准定量样本中靶蛋白含量。
产品参数:
产品名称 | 人碱性胎儿蛋白(BFP)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E2733 |
英文名称 | BFP ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:检出限 3.2U/L
检测范围:6.5~416U/L
反应时间:样本温育 75min,酶结合物 45min,显色 17min
保存条件:2~8℃冷藏,洗涤液室温存放即可,有效期 6 个月
显色系统:HRP 催化 TMB 显色,稀硫酸终止反应
检测波长:450nm 单波长测定吸光度
标准曲线绘制:四参数 Logistic 拟合标准曲线,软件自动输出样本浓度结果
注意事项:黄疸血清会干扰检测结果;每批次实验必须同步做标准曲线;板条勿混用不同试剂盒
关键注意事项:
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
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实验操作流程:
试剂盒室温回温 27min,拆分酶标条,排布标准孔、样品孔、空白孔,每孔加入待测稀释液 100μL,空白孔补稀释液。
直接加入酶标记抗原工作液 60μL,震荡混匀后覆膜封口。
37℃避光孵育 55min,稳定孵育温度,减少误差。
开封倒液,洗涤液加满每孔静置 35s 后拍干,循环洗板 4 次。
每孔添加显色 A、B 液各 50μL,暗处 37℃显色 13min。
滴加终止液 50μL 并混匀,终止酶促显色。
酶标仪 450nm 读数,参照标准曲线计算 BFP 含量。
关键字: 人碱性胎儿蛋白;BFP;ELISA试剂盒;
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