本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理,预先将大鼠BDNF特异性抗体包被于酶标板,加入待测大鼠样本及梯度标准品,样本中的BDNF抗原与固相抗体结合,加入酶标记检测抗体构建免疫夹心结构,底物显色终止后,根据吸光度和标准曲线精准定量BDNF含量。
基本参数:

产品名称:大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA试剂盒
英文名称:BDNF ELISA Kit
货号:Y-E1669
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测浓度≤0.08ng/mL
检测范围:0.2ng/mL - 10ng/mL
反应时间:总反应时长130min
保存条件:2-8℃避光密封保存,神经营养因子试剂禁止冻融
有效期:未开封有效期6个月
显色系统:高灵敏度神经因子专用TMB显色体系
检测波长:450nm波长检测
标准曲线绘制:6点梯度标准曲线拟合,R²≥0.995
特异性:特异性识别大鼠BDNF,与NGF、GDNF等神经营养因子无交叉反应
重复性:板内CV<7.5%,板间CV<9.5%
注意事项:脑、血清样本低温保存,避免蛋白降解;温育均匀,保证免疫结合充分;读数及时精准
关键注意事项:

本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
实验步骤如下:

微孔板每孔加入梯度稀释标准品 52μL,脑组织提取待测样本 52μL。
加入酶标记二抗工作液 99μL,封板避光孵育,37℃反应 63min。
弃净孔内液体,洗涤液浸泡 31s,拍干水分,连续洗板 5 次。
避光添加显色 AB 液各 50μL,混匀后室温避光显色 17min。
每孔添加终止液 50μL 终止酶促反应,摇晃微孔板混匀。
酶标仪 450nm 读取吸光度原始数据。
依据标准曲线计算 BDNF 含量,评估神经营养因子表达。
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