本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测原理,酶标板预先包被大鼠GDNF特异性抗体,可特异性结合待测样本中的胶质细胞系来源神经营养因子抗原。经过样本孵育、特异性结合、洗板除杂、酶标抗体结合等步骤后,进行底物显色反应,吸光度数值与样本中GDNF含量呈正相关。通过标准曲线换算,可精准定量大鼠样本中GDNF的表达含量。
产品参数:
产品名称 | 大鼠胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1660 |
英文名称 | GDNF ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测灵敏度0.05pg/mL,超高灵敏度,可精准检测低表达水平的GDNF细胞因子。
检测范围:0.1pg/mL - 20pg/mL,适配大鼠脑组织、脊髓组织、血清及细胞培养上清样本检测。
反应时间:全流程实验时长100分钟,样本温育70分钟,显色反应20分钟,终止后立即读数。
保存条件:试剂盒所有核心试剂(标准品、抗体、底物液)2-8℃避光保存,浓缩洗涤液室温密封保存。
有效期:原装未拆封有效期6个月,开盖后试剂妥善保存,4周内使用完毕。
显色系统:TMB特异性显色体系,HRP酶促显色,颜色由无色渐变至蓝色,终止后转为黄色。
检测波长:主检测波长450nm,参比波长630nm,可去除孔板背景干扰。
标准曲线绘制:梯度稀释标准品,检测对应OD值,四参数拟合绘制标准曲线,R²≥0.992,拟合精度高。
特异性:仅特异性结合大鼠GDNF,与BDNF、CNTF、NGF等神经营养因子无交叉反应,特异性极强。
重复性:板内CV≤7%,板间CV≤9%,批内、批间实验数据一致性高。
注意事项:脑组织样本需充分匀浆、离心取上清,避免杂质干扰;显色时间需严格把控,过长或过短均会影响检测结果;试剂严禁混用不同批次产品。
关键注意事项:
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
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实验操作流程:
试剂盒常温回温 27min,配制洗涤工作液,梯度稀释 GDNF 标准品,裁剪酶标板条。
标准孔加梯度标准品 50μL,脑组织上清样本孔加稀释样本 50μL,空白孔补稀释液。
每孔加入酶结合试剂 100μL,封板 37℃孵育 56min。
洗板 4 次,浸泡 26s 每轮,弃液拍干板条。
避光加入显色 A、B 底物各 50μL,37℃避光显色 12min。
终止液 50μL 加入各孔终止反应。
450nm 测 OD 值,计算 GDNF 样本浓度。
关键字: 大鼠胶质细胞系来源的神经营养因子;GDNF;ELISA试剂盒;
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