本试剂盒采用经典双抗体夹心ELISA原理,酶标板微孔包被抗大鼠FⅢ特异性抗体,待测大鼠样本中的FⅢ抗原与固相抗体特异性结合,洗涤后加入辣根过氧化物酶标记二抗,形成特异性免疫复合物,底物显色后根据吸光度数值,结合标准曲线定量检测FⅢ浓度。
基本参数:

产品名称:大鼠凝血因子Ⅲ(FⅢ)ELISA试剂盒
英文名称:FⅢ ELISA Kit
货号:Y-E1106
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测浓度≤0.09ng/mL,可精准检测大鼠组织、血浆中凝血因子Ⅲ微量表达。
检测范围:0.1ng/mL - 22ng/mL,适配大鼠内源性凝血、组织损伤模型样本检测。
反应时间:总实验时长95分钟,样本孵育30min、酶孵育30min、显色20min、终止15min。
保存条件:2-8℃避光冷藏保存,开封板条密封防潮,禁止冷冻。
有效期:原装试剂盒有效期6个月,恒温存放稳定。
显色系统:高灵敏TMB显色体系,背景值低,显色梯度区分明显。
检测波长:450nm检测波长,630nm校正波长,提升检测精度。
标准曲线绘制:四参数拟合标准曲线,R²≥0.992,定量误差小。
特异性:专一识别大鼠凝血因子Ⅲ,无其他凝血因子交叉反应。
重复性:板内CV≤7%,板间CV≤9%,重复性优异。
注意事项:避免脂血、溶血样本,防止干扰抗原抗体结合;显色后按时终止,避免过度显色。
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

预包被板每孔上样梯度标准品 47μL,组织匀浆待测样本 47μL,空白孔补稀释液。
HRP 标记抗体液 104μL 加入各孔,覆膜封板,37℃孵育 58min。
洗涤液注满微孔静置 31s,弃液拍干,洗板 4 次。
避光加入显色 AB 液各 50μL,轻微摇晃微孔板,显色 17min。
终止液 50μL 每孔添加,终止显色反应并混匀。
酶标仪 450nm 检测 OD 值,扣除空白基线干扰。
计算凝血因子 Ⅲ 浓度,检测外源性凝血启动因子水平。
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