大鼠凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA试剂盒

本试剂盒依托双抗体夹心酶联免疫吸附技术原理，固相载体包被大鼠FⅩⅢ特异性抗体，样本及标准品中的FⅩⅢ抗原与抗体特异性免疫结合，加入酶标记二抗后形成免疫复合物，催化底物显色，颜色深浅对应FⅩⅢ含量，通过吸光度读数及标准曲线换算实现定量检测。
基本参数‌：

产品名称：大鼠凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA试剂盒

英文名称：FⅩⅢ ELISA Kit
货号：Y-E1105

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测下限≤0.07ng/mL，可精准检出大鼠血浆中FⅩⅢ微量表达。

检测范围：0.1ng/mL - 19ng/mL，覆盖大鼠凝血交联、血栓形成相关样本检测区间。

反应时间：全程实验95分钟，样本孵育30min、酶孵育30min、显色20min、终止15min。

保存条件：2-8℃避光冷藏，微孔板开封后密封防潮，试剂严禁冷冻。

有效期：未开封试剂盒有效期6个月，规范存放性能稳定。

显色系统：高灵敏TMB显色体系，显色梯度清晰，适合微量凝血因子检测。

检测波长：450nm主波长，630nm参比波长，校正系统误差。

标准曲线绘制：四参数Logistic拟合曲线，R²≥0.992，定量精度高。

特异性：专一识别大鼠凝血因子ⅩⅢ，无同源蛋白交叉反应。

重复性：板内CV≤7%，板间CV≤9%，重复性优异。

注意事项：样本采集后尽快检测，避免FⅩⅢ活性衰减；实验耗材无凝血污染。
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

微孔板分孔上样梯度标准品 50μL，抗凝血浆样本 50μL，空白孔添加缓冲稀释液。

酶结合检测液 100μL 加入每孔，封板膜封闭，37℃孵育 61min。

洗板液加满微孔静置 32s，弃液拍干，重复洗涤 5 次。

避光依次加入显色 A 液、B 液各 50μL，轻摇板体，避光显色 19min。

每孔加入终止液 50μL 终止反应，混匀微孔板内体系。

酶标仪 450nm 读取 OD 读数，剔除异常复孔。

换算凝血因子 ⅩⅢ 浓度，检测凝血交联稳定因子表达。
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