本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，将大鼠FⅧ-Ag特异性抗体包被于酶标板表面，加入标准品和待测大鼠样本，样本内FⅧ-Ag抗原与固相抗体特异性结合，后续结合酶标记抗体形成免疫复合物，显色检测后通过标准曲线精准测定FⅧ-Ag的含量。
基本参数：
产品名称：大鼠凝血因子Ⅷ相关抗原(FⅧ-Ag)ELISA试剂盒
英文名称：FⅧ-Ag ELISA Kit
货号：Y-E1305
规格：48T/96T
灵敏度：最低检测下限≤0.08ng/mL，可精准检出大鼠血浆中FⅧ-Ag微量含量。
检测范围：0.1ng/mL - 20ng/mL，覆盖大鼠凝血功能障碍、血管疾病样本检测区间。
反应时间：全程实验105分钟，样本孵育35min、酶孵育35min、显色20min、终止15min。
保存条件：2-8℃避光冷藏，抗原抗体试剂单独密封存放，严禁冷冻失活。
有效期：未开封试剂盒有效期6个月，规范存放无性能衰减。
显色系统：优化型TMB显色体系，针对凝血抗原检测优化，显色稳定无偏差。
检测波长：450nm主波长，600nm参比波长，双波长校正误差。
标准曲线绘制：四参数Logistic拟合曲线，R²≥0.991，精准定量抗原浓度。
特异性：特异性识别大鼠FⅧ-Ag，与其他凝血因子抗原无交叉反应。
重复性：板内CV≤8%，板间CV≤10%，实验重复性良好。
注意事项：血浆样本需新鲜制备，避免长期放置导致抗原降解；实验全程无菌无热源操作。
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：
微孔板每孔加入梯度稀释标准品 51μL，抗凝血浆样本 51μL，做好孔位区分标记。
每孔加入酶标检测试剂 98μL，封板避光，37℃孵育 65min。
弃去废液，洗涤液浸泡 22s，拍干，洗板 5 轮。
避光添加显色底物 A、B 各 50μL，混匀暗处显色 15min。
终止液 50μL 滴加至每孔，终止反应并横向混匀板内液体。
板底除水渍后酶标仪 450nm 读取 OD 数值。
曲线拟合 FⅧ 相关抗原浓度，评价血管内皮损伤与凝血功能。
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