本试剂盒采用双抗体夹心ELISA技术原理,固相载体包被大鼠CIAP特异性捕获抗体,待测大鼠样本中的CIAP抗原与抗体特异性结合,洗去未结合杂质后加入酶标二抗形成免疫复合物,底物显色深浅与CIAP含量呈正相关,通过吸光度检测及标准曲线换算,精准定量样本中CIAP浓度。
基本参数:

产品名称:大鼠牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)ELISA试剂盒
英文名称:CIAP ELISA Kit
货号:Y-E1234
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测浓度≤0.1U/L,可精准检测大鼠组织、体液中CIAP微量酶活性。
检测范围:0.2U/L - 35U/L,适配大鼠骨骼、肠道功能相关样本CIAP检测。
反应时间:总实验时长105分钟,样本孵育35min、酶孵育35min、显色20min、终止15min。
保存条件:2-8℃避光冷藏保存,酶试剂严禁高温、冷冻存放,防止活性丧失。
有效期:原装试剂盒有效期6个月,恒温恒湿存放稳定。
显色系统:碱性磷酸酶专用优化TMB显色体系,酶促反应匹配度高,显色稳定。
检测波长:450nm检测波长,600nm校正波长,有效降低背景干扰。
标准曲线绘制:四参数拟合标准曲线,R²≥0.990,满足酶活性精准定量需求。
特异性:特异性识别大鼠CIAP,与酸性磷酸酶、其他碱性磷酸酶同工酶无交叉反应。
重复性:板内CV≤8%,板间CV≤10%,实验重复性达标。
注意事项:样本处理全程低温,防止CIAP酶活性降解;显色反应严格控温控时,保证结果稳定。
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

微孔板每孔加入梯度稀释 CIAP 标准品 52μL,待测酶液样本 52μL,全程避光防酶失活。
直接加入酶标记工作液 99μL,封板恒温孵育,37℃反应 60min。
废液排空,洗涤液浸泡 33s,拍干残留液体,洗板 4 次。
避光添加显色 AB 液各 50μL,混匀室温显色 17min。
每孔滴入终止液 50μL 终止显色,晃动微孔板混匀孔内液体。
酶标仪 450nm 测定吸光度数值,快速完成检测防止底物降解。
依据标准曲线计算 CIAP 蛋白含量,定量碱性磷酸酶表达水平。
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