本试剂盒依托双抗体夹心ELISA检测技术,固相酶标板包被大鼠MIP-5特异性抗体,能够特异性捕获样本中的巨噬细胞炎症蛋白5抗原。加入梯度标准品和待测样本孵育结合,洗涤去除未结合组分后,加入酶标检测抗体构建免疫复合物,底物显色信号强度与MIP-5含量正相关。通过标准曲线换算,可精准定量大鼠样本中MIP-5的含量。
产品参数:
产品名称 | 大鼠巨噬细胞炎症蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1441 |
英文名称 | MIP-5 ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测下限0.1pg/mL,可精准检测低丰度MIP-5炎性因子。
检测范围:0.2pg/mL - 16pg/mL,适配大鼠炎症组织、血清、细胞培养上清样本。
反应时间:全流程90分钟,温育60分钟,显色15分钟。
保存条件:2-8℃避光冷藏保存,严禁冷冻试剂。
有效期:原装有效期6个月,开封后30天内用完。
显色系统:经典TMB-HRP显色体系,显色均匀无杂色。
检测波长:450nm单一波长检测。
标准曲线绘制:四参数Logistic拟合曲线,R²≥0.990。
特异性:特异性识别大鼠MIP-5,与其他巨噬细胞炎性蛋白无交叉反应。
重复性:板内CV≤8%,板间CV≤10%。
注意事项:样本采集后及时检测,避免因子降解;实验全程无菌无污染,保证数据准确。
试剂盒组成:
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
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实验操作流程:
试剂盒常温静置 33min,稀释洗涤液,复溶 MIP-5 冻干标准品并梯度稀释,取用酶标板条备用。
标准孔加入梯度浓度标准品 50μL,细胞上清样本孔加入待测稀释液 50μL,空白孔补样本稀释液。
每孔加入酶结合试剂 100μL,封板膜封闭,37℃孵育 69min。
洗板 5 次,洗液浸泡 33s 每次,弃液后充分拍干板孔残留液体。
避光加入显色 A、B 液各 50μL,37℃避光显色 18min。
加入终止液 50μL 终止显色,轻晃混匀。
酶标仪 450nm 读数,标准曲线定量 MIP-5 含量。
关键字: 大鼠巨噬细胞炎症蛋白5;MIP-5;ELISA试剂盒;
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