大鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，固相酶标板包被大鼠MIP-2特异性捕获抗体，可特异性结合待测样本中的巨噬细胞炎性蛋白2抗原。经过孵育结合、洗板除杂、酶标抗体结合、底物显色反应后，检测所得吸光度值与样本中MIP-2含量呈线性正相关。通过标准曲线换算，可精准定量大鼠样本中MIP-2的表达浓度。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测下限0.1pg/mL，高灵敏度检测炎症相关炎性蛋白。

检测范围：0.2pg/mL - 22pg/mL，适配大鼠炎症模型组织、血清、细胞上清。

反应时间：全流程95分钟，温育65分钟，显色20分钟。

保存条件：2-8℃避光保存，严禁冷冻试剂。

有效期：原装有效期6个月，开封后4周内用完。

显色系统：HRP催化TMB底物显色，反应稳定灵敏。

检测波长：450nm检测，630nm校正背景。

标准曲线绘制：四参数拟合曲线，R²≥0.991。

特异性：特异性结合大鼠MIP-2，与其他炎性蛋白无交叉反应。

重复性：板内CV≤7%，板间CV≤9%。

注意事项：炎症样本需低温处理，防止因子降解；显色时间严格把控，保证结果精准。
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

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实验操作流程：

试剂盒常温放置 31min，配比浓缩洗涤液配制工作液，梯度稀释 MIP-2 标准品，固定酶标板条数。

标品孔加梯度标准品 50μL，炎症组织样本孔加入稀释后样本 50μL，空白孔补样本稀释液。

每孔加入酶标记抗体 100μL，封板 37℃孵育 65min。

洗板 5 次，浸泡 31s 每次，彻底弃净液体后吸水纸拍干板孔。

避光加入显色 A、B 液各 50μL，37℃避光显色 16min。

滴入终止液 50μL，轻微震荡终止显色。

酶标仪 450nm 测值，计算 MIP-2 样本浓度。