本试剂盒基于双抗体夹心酶免疫检测原理,酶标板预先包被大鼠MIF特异性捕获抗体,可特异性识别并结合样本中的巨噬细胞移动抑制因子抗原。孵育完成特异性免疫结合后,洗涤去除游离杂质,加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体,形成固相抗体-抗原-酶标抗体复合物。经底物显色、终止反应后检测吸光度,依据标准曲线可精准定量大鼠样本中MIF的表达浓度。
产品参数:
产品名称 | 大鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1581 |
英文名称 | MIF ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测灵敏度0.05ng/mL,超高灵敏度检测炎症核心因子。
检测范围:0.1ng/mL - 14ng/mL,适配大鼠各类炎症组织、血清、细胞上清样本。
反应时间:全流程100分钟,温育70分钟,显色20分钟。
保存条件:2-8℃避光冷藏保存,洗涤液室温密封存放。
有效期:未开封试剂盒有效期6个月,开封后4周内使用完毕。
显色系统:HRP-TMB特异性显色系统,反应稳定、灵敏度高。
检测波长:450nm检测,630nm校正背景误差。
标准曲线绘制:四参数拟合标准曲线,R²≥0.993。
特异性:特异性结合大鼠MIF,无其他炎症因子交叉反应。
重复性:板内CV≤6%,板间CV≤8%,重复性优异。
注意事项:样本避免溶血、脂血;温育温度严格恒定;标准品梯度稀释需精准,保证曲线精度。
关键注意事项:
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
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实验操作流程:
试剂室温平衡 30min,配比洗涤工作液,梯度稀释 MIF 标准品,拆分酶标板条。
空白孔加稀释缓冲液,标准孔依次添加梯度标品 50μL,待测样本孔上样 50μL 预处理生物样本。
全孔加入酶标记抗体工作液 100μL,封板 37℃孵育 60min。
洗板 5 次,浸泡 30s 每轮,甩干液体并吸水纸拍干微孔。
避光添加显色 A、B 底物各 50μL,37℃避光显色 15min。
终止液 50μL 滴入各孔终止酶促反应。
450nm 测定 OD 值,换算巨噬细胞移动抑制因子 MIF 检测浓度。
关键字: 大鼠巨噬细胞移动抑制因子;MIF;ELISA试剂盒;
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