人28S抗核糖体抗体(28S rRNP)ELISA试剂盒

本试剂盒采用间接法酶联免疫吸附检测原理，微孔板预先包被纯化的人28S核糖体核糖核蛋白抗原，加入稀释后的待测血清、血浆样本及标准品，样本中特异性的28S rRNP抗体可与固相抗原特异性结合，孵育洗涤后，加入酶标记的抗人IgG二抗，使其与样本结合的一抗特异性结合，再次洗涤去除未结合酶标二抗，加入底物显色液发生酶促显色反应，显色强度与样本中28S rRNP抗体含量呈正相关，通过酶标仪读数并结合标准曲线，可精准定量样本中该抗体的表达水平。
基本参数‌：

产品名称：人28S抗核糖体抗体(28S rRNP)ELISA试剂盒

英文名称：28S rRNP Elisa Kit
货号：Y-E434

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度0.2U/mL，可精准检测人体自身免疫性抗体微量表达水平

检测范围：0.5U/mL - 120U/mL，适配自身免疫疾病筛查及病情监测样本

反应时间：标准反应流程时长110分钟，包含样本结合、酶结合、显色终止全流程

保存条件：所有试剂2-8℃避光密封保存，避免高温、光照导致抗体失活

有效期：原装试剂盒有效期9个月，开封后试剂1个月内使用完毕

特异性：仅特异性结合人28S抗核糖体抗体，与其他核糖体抗体、自身抗体无交叉反应

重复性：板内CV≤7.5%，板间CV≤10%，检测结果稳定可靠

注意事项：样本需无溶血、无细菌污染，避免反复冻融；温育温度恒定37℃，显色时间统一，避免人为误差
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：

样本处理：患者血清样本室温融化，轻微混匀，严重脂血样本过滤后使用；标准品复溶后倍比稀释，配置 5 个浓度梯度标准品。

加样上板：空白孔加入阴性对照稀释液 50μL；标准品孔加入梯度标准品 50μL；样本孔加入待测血清 50μL，加样避免交叉污染。

一步法添加酶结合试剂：全部孔位加入酶标记捕获抗体工作液 100μL，封板密封，手动轻晃酶标板 15s。

温育反应：37℃避光孵育 55min，让抗体与靶标抗原充分结合。

洗板步骤：弃净孔内液体，洗涤液注满每孔，浸泡 35s 后甩干，循环洗板 5 次，充分洗去未结合游离组分。

显色反应：每孔依次加入显色液 A、B 各 50μL，避光 37℃反应 18min。

终止定量：加入终止液终止显色，10min 内在 450nm 波长检测吸光度，绘制标准曲线计算 28S rRNP 抗体滴度。
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