本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测原理,将大鼠Lp-α特异性单克隆抗体固定于酶标板微孔表面作为固相载体。实验过程中,待测样本及梯度标准品中的大鼠Lp-α可与微孔内固相抗体特异性结合,洗板清除未结合杂质后,加入酶标记的Lp-α特异性抗体进行孵育,形成稳定的夹心式免疫结合物。经充分洗涤去除未结合酶标抗体后,加入TMB底物显色,酶促反应生成的有色产物深浅与样本中Lp-α含量成正比,加入终止液终止反应后,通过酶标仪检测对应波长吸光度,依据标准曲线即可定量检测样本中大鼠Lp-α的含量。
产品参数:
产品名称 | 大鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1304 |
英文名称 | Lp-α ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测浓度≤0.5mg/L
检测范围:1.0mg/L - 200mg/L
反应时间:总反应时长150分钟(样本孵育90min、酶标孵育30min、显色30min)
保存条件:2-8℃避光冷藏,浓缩洗涤液低温结晶属正常现象,37℃水浴溶解后使用
有效期:原装未拆封12个月
检测波长:450nm
标准曲线绘制:梯度标准品稀释后检测OD值,四参数拟合曲线,R²≥0.992
注意事项:血清样本需离心去除血脂沉淀,避免脂血、溶血样本检测,影响数值准确性
关键注意事项:
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
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实验操作流程:
1. 试剂盒组分室温复温 25min,浓缩洗涤液用纯水稀释配制成工作洗涤液,分离待测血浆样本避免溶血,酶标板按需拆封使用。
2. 划分标准品孔、样品孔、空白对照孔,标准品孔加入不同梯度浓度 Lp-α 标准品 50μL,样本孔加 50μL 待测血浆,空白孔加稀释液。
3. 所有孔位直接添加 100μL 酶标记抗体工作液,覆膜封板,低速震荡混匀后置于 37℃温箱孵育 70min。
4. 倒掉孔中反应液,每孔注满洗涤液浸泡 40s 后倒扣拍干,循环洗板 4 次,彻底清除未结合游离组分。
5. 每孔分别加入显色液 A 50μL、显色液 B 50μL,避光环境下 37℃避光反应 12min。
6. 每孔加入 50μL 终止溶液,摇晃酶标板使孔内液体混合均匀,终止显色反应。
7. 酶标仪 450nm 检测吸光度,拟合标准曲线换算样本脂蛋白 α 含量。
关键字: 大鼠脂蛋白α;Lp-α;ELISA试剂盒;
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