人8-异构前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)ELISA试剂盒

本试剂盒基于竞争ELISA检测原理研发，微孔板预先包被8-异构前列腺素F2α固相抗原，检测体系中加入梯度标准品、待测样本及特异性抗体，样本中的8-epi-PGF2α与固相抗原竞争结合抗体位点，孵育平衡后洗涤除去游离反应物，加入酶标记二抗结合一抗，充分洗涤后加入底物显色，显色强度随样本中目标指标浓度升高而降低，通过酶标仪检测吸光度并对照标准曲线，可定量检测样本中8-异构前列腺素F2α的含量。
基本参数‌：

产品名称：人8-异构前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)ELISA试剂盒

英文名称：8-epi-PGF2伪 ELISA Kit
货号：Y-E2534

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测灵敏度0.12pg/mL，适配氧化应激相关前列腺素标志物检测

检测范围：0.4pg/mL - 150pg/mL，覆盖人体氧化损伤梯度表达范围

反应时间：标准反应时长110分钟，分步温育，结合充分

保存条件：2-8℃避光密封保存，所有试剂避免光照、高温环境

有效期：原装有效期9个月，开封后30天内使用

特异性：特异性结合8-epi-PGF2α，与天然前列腺素及异构体无交叉反应

重复性：板内CV≤7.2%，板间CV≤9.2%，数据稳定可靠

注意事项：血清、尿液样本需预处理除杂；显色过程严格避光，禁止超时反应，保证检测精准度
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

样本处理：血浆样本室温融化，低速离心去除絮状沉淀；标准品复溶后梯度稀释配制标准系列。

上样加液：空白孔加入稀释缓冲液 50μL，标准品孔与样本孔各加入待测液 50μL。

一步加入酶结合物：全部孔加入酶标记抗体工作液 100μL，封板混匀。

孵育反应：37℃避光孵育 66min。

洗板操作：洗涤液浸洗每孔 30s，重复 5 次，吸干残留液体。

底物显色：显色混合液 100μL / 孔，37℃避光显色 15min。

终止定量：终止液终止显色，450nm 测定吸光度，换算样本 8-epi-PGF2α 浓度。
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