本试剂盒以双抗体夹心酶联免疫吸附技术为核心,酶标板微孔预先包被大鼠TNFsR-Ⅰ特异性抗体。孵育过程中,样本、标准品中的大鼠TNFsR-Ⅰ抗原与固相抗体特异性结合,洗涤清除未结合物质后,加入HRP标记的TNFsR-Ⅰ检测抗体,形成稳定的免疫夹心复合物。通过TMB底物显色反应生成有色产物,产物吸光度大小对应样本中TNFsR-Ⅰ的含量高低,终止反应后检测吸光度,依据标准曲线即可完成定量检测。
产品参数:
产品名称 | 大鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1529 |
英文名称 | TNFsR-Ⅰ ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测浓度≤5.0pg/mL
检测范围:10pg/mL - 300pg/mL
反应时间:总反应130分钟(孵育70min、酶孵育30min、显色30min)
保存条件:2-8℃冷藏避光,禁止冻融试剂
有效期:12个月
检测波长:450nm
标准曲线绘制:四参数拟合标准曲线,R²≥0.990
注意事项:洗板力度均匀,避免孔内残留液体,防止背景值偏高
试剂盒组成:
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
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实验操作流程:
1. 浓缩洗涤液稀释为工作液,所有试剂室温静置 30min,待测样本预处理离心取上清,酶标板按需取用。
2. 标准品孔梯度加样 50μL TNFsR-Ⅰ 标准品,样本孔加入 50μL 待测液,空白孔补加稀释缓冲液。
3. 每孔加入酶标记抗体工作液 100μL,封板封口,37℃温育 56min。
4. 弃液后洗板 6 次,每次浸泡 30s,彻底拍干微孔内液体。
5. 避光加入显色底物 A、B 各 50μL,混匀后 37℃避光显色 14min。
6. 滴加终止液 50μL,充分混匀终止反应。
7. 450nm 测定吸光度,标准曲线计算受体 Ⅰ 含量。
关键字: 大鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ;TNFsR-Ⅰ;ELISA试剂盒;
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