本试剂盒采用经典双抗体夹心ELISA检测原理,酶标板固相微孔固定有纯化的大鼠TNFsR-Ⅱ特异性捕获抗体。检测孵育时,待测样本与梯度标准品中的TNFsR-Ⅱ抗原与固相抗体特异性结合,洗板去除杂质后,加入酶标记的TNFsR-Ⅱ检测抗体进行孵育结合。经TMB底物显色、终止液终止反应后,吸光度值与样本中TNFsR-Ⅱ浓度呈正相关,通过标准曲线计算可精准测定大鼠样本中该可溶性受体的含量。
产品参数:
产品名称 | 大鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1530 |
英文名称 | TNFsR-Ⅱ ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测浓度≤5.0pg/mL
检测范围:10pg/mL - 350pg/mL
反应时间:总反应130分钟(37℃孵育70min、酶反应30min、显色30min)
保存条件:2-8℃密封避光保存,开封试剂1个月内用完
有效期:12个月
检测波长:450nm/630nm双波长校正
标准曲线绘制:梯度标准品OD值拟合曲线,R²≥0.991
注意事项:样本稀释比例需精准,避免浓度超出检测范围导致结果失真
关键注意事项:
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
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实验操作流程:
1. 试剂室温平衡 35min,稀释洗涤液,避免样本溶血与反复冻融,标记酶标板空白、标准、样本孔。
2. 标准品孔加入不同浓度标准品 50μL,待测样本孔上样 50μL 样本,空白孔添加稀释液。
3. 各孔加入酶偶联工作液 100μL,封板膜密封,37℃孵育 64min。
4. 洗板 5 次,洗涤液浸泡 35s / 次,甩干后吸干板孔水分。
5. 避光加显色 A、B 液各 50μL,轻微震荡,37℃避光显色 18min。
6. 加入终止液 50μL 混匀终止显色。
7. 450nm 读取 OD 值,计算 TNFsR-Ⅱ 浓度。
关键字: 大鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ;TNFsR-Ⅱ;ELISA试剂盒;
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