大鼠转化生长因子α(TGF-α)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，酶标板微孔预先包被高特异性大鼠TGF-α抗体。检测时，样本、标准品中的大鼠TGF-α抗原与固相抗体特异性结合，洗涤去除未结合组分后，加入HRP标记的TGF-α二抗进行孵育结合，形成特异性免疫复合物。经TMB底物酶促显色、终止反应后，溶液吸光度与样本中TGF-α浓度呈正相关，对照标准曲线即可精准检测样本中转化生长因子α的含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度≤2.0pg/mL

检测范围：5pg/mL - 150pg/mL

反应时间：总反应120分钟（孵育60min、酶孵育30min、显色30min）

保存条件：2-8℃避光冷藏，避免生长因子失活

有效期：12个月

检测波长：450nm

标准曲线绘制：四参数Logistic拟合，R²≥0.992

注意事项：样本避免反复冻融，全程低温避光操作
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。

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实验操作流程：

1. 试剂盒所有试剂室温平衡 30min，配制 1× 洗涤工作液，细胞培养上清样本离心去除细胞碎片，按需拆分酶标板。

2. 标准品孔加入梯度稀释 TGF-α 标准品 50μL，样本孔加入 50μL 待测上清，空白孔加稀释缓冲液。

3. 各孔加入酶偶联工作液 100μL，封板膜密封，37℃温育 60min。

4. 洗板 5 次，洗涤液浸泡 35s / 轮，甩干后吸干微孔水分。

5. 避光添加显色底物 A、B 各 50μL，轻柔混匀，37℃避光显色 15min。

6. 每孔加入终止液 50μL 混匀终止反应。

7. 酶标仪 450nm 读取吸光度，拟合标准曲线得到 TGF-α 浓度。