人Apelin 36(AP36)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，预先将特异性AP36抗体包被于酶标板微孔内，样本、标准品中的人Apelin 36抗原会与包被抗体特异性结合，再加入酶标记二抗形成固相抗体-抗原-酶标抗体复合物，彻底洗去未结合的游离物质后，加入底物显色液进行显色反应，通过终止液终止反应，最终利用酶标仪测定各孔吸光度值，结合标准曲线即可精准计算样本中人Apelin 36的含量。
基本参数‌：

产品名称：人Apelin 36(AP36)ELISA试剂盒

英文名称：AP12 ELISA Kit 96T/48T
货号：Y-E2518

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度可达0.1ng/mL，可精准检测样本中微量AP36含量，无基底干扰

检测范围：0.25ng/mL - 8ng/mL，覆盖人体生理及病理状态下AP36常规表达浓度区间

反应时间：整体孵育反应时长90分钟，包含样本结合、酶联反应、显色全过程

保存条件：试剂盒未开封组分2-8℃冷藏保存，避光防潮，严禁冷冻

有效期：未开封密封状态下有效期6个月，开封后1个月内用完

特异性：仅特异性识别人体AP36蛋白，与Apelin其他亚型及同源蛋白无交叉反应

重复性：板内变异系数CV≤6%，板间变异系数CV≤8%，检测稳定性优异

注意事项：样本需避免反复冻融，显色反应需严格避光，终止液加入顺序不可颠倒，实验耗材需无热源无污染
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果
实验步骤如下：

提前将试剂盒所有试剂、待测样本从冷藏环境取出，室温平衡 30min，配制洗涤工作液、标准品梯度稀释液，标记酶标板对应孔位（标准品孔、样本孔、空白孔）。

标准品孔每孔加入 50μL 梯度稀释好的 AP36 标准品溶液，待测样本孔每孔加入 50μL 预处理完毕的人血清 / 组织上清待测样品，空白对照孔仅加入等量样本稀释液，全程避免孔内产生气泡。

每孔直接加入 100μL 预先混合好的酶结合物工作液（一步法预混酶标二抗 + 显色辅助液），封板膜密封酶标板，置于 37℃恒温孵育箱避光孵育 60min。

揭去封板膜，倒掉孔内全部液体，每孔加满洗涤缓冲液，静置 30s 后甩干液体，重复洗板 5 次，每次洗板后在吸水纸上拍干残余液体。

洗板完成后无需换液，每孔加入 90μL TMB 单组分显色底物液，37℃避光恒温显色 15min，密切观察标准品孔颜色梯度变化。

显色终止后快速向每孔滴加 50μL 终止反应液，轻柔晃动酶标板 10s 混匀液体，终止酶促显色反应。

15min 内使用酶标仪设置 450nm 主波长、630nm 参比波长读取各孔 OD 吸光度值，根据标准品浓度与对应 OD 值绘制标准曲线，计算样本中 AP36 实际浓度。
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