本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，微孔板预先包被人apelin 13特异性捕获抗体，加入梯度标准品、待测样本后，样本中的AP13抗原与固相抗体特异性结合，孵育结束后洗板去除未结合组分，加入酶标记AP13检测抗体形成免疫夹心复合物，充分洗涤后加入底物显色液发生酶促显色反应，产物颜色深浅与样本中AP13含量成正比，通过酶标仪读数并拟合标准曲线，可精准定量apelin 13的浓度。
基本参数：
产品名称：人apelin 13(AP13)ELISA试剂盒
英文名称：AP13 ELISA Kit 96T/48T
货号：Y-E2517
规格：48T/96T
灵敏度：最低检测0.05ng/mL，超高灵敏度适配心血管调控肽检测
检测范围：0.1ng/mL - 35ng/mL，覆盖心血管、代谢相关表达区间
反应时间：全程实验时长100分钟，流程标准化，控温精准
保存条件：2-8℃避光冷藏保存，小分子肽试剂密封防挥发
有效期：未开封有效期8个月，开封后25天内用完
特异性：特异性识别apelin 13肽段，与apelin其他亚型无交叉反应
重复性：板内CV≤6.5%，板间CV≤8.5%，重复性优异
注意事项：血清样本新鲜采集、低温保存；显色避光操作，终止后立即读数，保证数据精准
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：
样本前处理：血浆样本 EDTA 抗凝处理后离心取上清，不可反复冻融；标准品粉剂溶解后梯度稀释配制 5 组标准梯度液。
加样入孔：空白孔添加稀释缓冲液 50μL，标准孔与样本孔分别加入待测液体 50μL。
一步加入酶结合工作液：每孔加入酶标记竞争抗体 100μL，封板轻微震荡板面。
温育孵育：37℃避光孵育 60min。
洗板除杂：洗涤液浸泡每孔 30s，连续洗板 5 次，彻底拍干残留液体。
底物显色：TMB 显色混合液 100μL / 孔，避光显色 14min。
终止定量：加入终止液终止反应，酶标仪 450nm 测定吸光度，计算 AP13 含量。
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