大鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测原理，在酶标板固相载体上包被大鼠组织蛋白去乙酰化酶（HD）特异性单克隆抗体，加入待测样本与标准品后，样本中的HD抗原与固相抗体发生特异性免疫结合，洗涤去除未结合组分后，加入辣根过氧化物酶标记的二抗进行结合反应，构建稳定的免疫夹心复合物，通过底物TMB显色及终止液终止反应后，吸光度值与样本中HD的含量成正比，依据标准曲线可定量测定样本中大鼠HD的表达水平。
产品参数：

‌灵敏度：最低检出限0.05U/mL，能够检测出大鼠样本中极低浓度的HD活性蛋白。

检测范围：0.1U/mL - 60U/mL，适配大鼠肝、肾、肿瘤组织及血清样本的HD含量检测。

反应时间：总反应时长100分钟，样本结合反应40分钟，终止显色反应20分钟，避光静置稳定10分钟读数。

保存条件：所有试剂组分2-8℃避光冷藏，浓缩洗涤液低温易结晶，使用前室温回暖摇匀即可。

有效期：原装未拆封有效期11个月，开封后试剂建议1个月内用完，避免活性衰减。

特异性：特异性识别大鼠组织蛋白去乙酰化酶，与乙酰化修饰同源蛋白、其他代谢酶无交叉结合反应。

重复性：板内CV≤5%，板间CV≤7%，批次间实验数据差异小，稳定性优异。

注意事项：实验耗材需无酶无污染，避免外源酶干扰检测结果；底物液需现用现取，暴露空气过久易失效。
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果

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实验操作流程：

提前 25min 将试剂盒从冷藏环境拿出回温，按比例浓缩洗涤液用蒸馏水稀释备用，标记酶标板孔位。

标准品用配套稀释液梯度稀释，待测组织样本离心取上清并适当稀释，每孔加 60μL 标准品上清 / 待测样品上清。

所有检测孔直接加入等量酶标记抗体工作液，空白孔仅加缓冲液，覆膜封闭板孔防止挥发。

置于 36℃恒温环境避光孵育 70min，让一抗、酶标二抗与靶标 HD 蛋白形成夹心复合物。

手动洗板，每孔注满洗涤液浸泡 40s 后倒扣拍干，连续洗板 4 次，彻底洗去未结合游离组分。

避光条件下每孔添加显色底物混合液 100μL，轻微晃动酶标板，室温避光显色 20min。

加入终止液终止显色反应，酶标仪 450nm 读取吸光度，拟合标准曲线换算样本中 HD 含量。