本试剂盒基于间接酶联免疫吸附试验原理设计，将纯化的人组织蛋白酶抗原包被于酶标板微孔内。检测时，样本中的人组织蛋白酶抗体（Cath Ab）可与微孔内固相抗原特异性结合，洗去未结合的游离成分后，加入酶标记的抗人IgG二抗，与结合在固相抗原上的目标抗体特异性结合。再次洗涤去除多余酶标二抗后，加入TMB底物发生酶促显色反应，显色深浅与样本中Cath Ab的含量呈正相关。终止显色后检测吸光度值，对照标准曲线即可定量检测样本中组织蛋白酶抗体的浓度。
基本参数：
产品名称：人组织蛋白酶抗体(Cath Ab)ELISA试剂盒
英文名称：Cath Ab Elisa Kit
货号：Y-E517
规格：48T/96T
灵敏度：最低可测 1.2U/mL 抗体效价
检测范围：2.5U/mL～150U/mL
反应时间：样本 37℃温育 100min，酶标记二抗 60min，避光显色 25min，终止 5min 内读数，总时长 185min
保存条件：整套试剂盒 2～8℃避光；标准品分装冻存于 - 20℃，避免反复冻融，其余组分 2～8℃
显色系统：单组份稳定型 TMB 显色液
检测波长：450nm 参考 650nm
标准曲线绘制：标准品倍比稀释，采用非线性回归构建标准曲线，计算样本抗体浓度
注意事项：血清样本避免高温灭活；阴性对照孔必须设置，排除内源抗体干扰；加样枪头一次性使用。
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：
试剂盒组分室温回温 25min，稀释浓缩洗涤液，准备阳性对照、阴性对照与 Cath Ab 标准品。
包被板每孔加入对应标准品、待测血清样本，设置空白对照孔，加样完毕轻振板面。
一步加入酶标记二抗工作液，封板膜密封微孔板，37℃孵育 50min。
掀开封膜，倒掉孔内液体，洗板 5 次，每次浸泡 35s，拍干微孔。
添加显色底物液，避光室温显色 14min。
加入终止液终止显色，混匀反应体系。
波长 450nm 检测 OD 值，拟合曲线定量样本中 Cath 抗体滴度。
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