本试剂盒运用双抗体夹心酶联免疫法检测样本中BCR含量,固相包被人BCR特异性抗体于酶标板微孔,孵育时样本、标准品中的BCR抗原与包被抗体特异性结合,加入酶标记二抗形成免疫夹心复合物,洗板净化后进行底物显色反应,终止显色后读取吸光度值,参照标准曲线即可定量分析样本中B细胞受体的表达水平。
基本参数:

产品名称:人B细胞受体(BCR)ELISA试剂盒
英文名称:BCR ELISA Kit
货号:Y-E2780
规格:48T/96T
灵敏度:最低检出限0.12ng/mL,灵敏检测B细胞膜受体蛋白
检测范围:0.35ng/mL - 13ng/mL,适配淋巴细胞样本BCR定量检测
反应时间:完整反应流程105分钟,膜受体结合反应充分稳定
保存条件:包被酶标板2-8℃冷藏,试剂原液避光密封保存
有效期:原装未拆封有效期12个月,开封试剂25天内有效
特异性:特异性结合人B细胞受体BCR,无其他免疫细胞受体交叉识别
重复性:板内CV≤6%,板间CV≤8%,免疫受体检测重复性达标
注意事项:淋巴细胞样本需新鲜制备,避免细胞凋亡导致受体脱落,实验耗材保证无菌无污染
试剂盒组成:

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下:

试剂盒组分室温回温 30min,稀释洗涤液,梯度稀释 BCR 标准品,区分酶标板各类孔并编号记录。
标准孔加入 50μL 梯度标准液,样本孔加入 50μL 淋巴细胞裂解待测样品,空白孔补稀释液。
所有孔加入 100μL 一步法酶标记工作液,封板密封,37℃避光孵育 52min。
倒掉废液,洗涤液浸泡洗板 5 次,每次 35s,吸水纸拍干残余洗液。
每孔加入 TMB 显色液 90μL,37℃避光显色 15min。
逐孔添加终止液 50μL 混匀终止显色。
酶标仪读取 OD 值,计算样本中 BCR 浓度。
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