本试剂盒以双抗体夹心酶联免疫法为核心检测原理,预先在酶标板包被C/EBPδ特异性捕获抗体,样本中的C/EBPδ抗原与固相抗体特异性结合,再加入酶标记检测抗体形成稳定免疫复合物,洗板去除非特异性结合组分后,通过TMB底物显色、终止反应,读取吸光度数值并对照标准曲线,完成样本中C/EBPδ的定量检测。
基本参数:

产品名称:人CCAAT增强子结合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA试剂盒
英文名称:C/EBP未 ELISA Kit
货号:Y-E2626
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测浓度0.13ng/mL,适配应激相关转录因子检测
检测范围:0.4ng/mL - 13ng/mL,覆盖炎症、代谢相关样本C/EBPδ表达区间
反应时间:标准反应时长95分钟,实验流程稳定高效
保存条件:酶标板及试剂2-8℃冷藏,避光防潮,单独密封存放
有效期:未拆封有效期8个月,开封后1个月内完成检测
特异性:专一靶向C/EBPδ蛋白,与同家族α、ε亚型无交叉反应
重复性:板内CV≤5%,板间CV≤7%,应激蛋白检测重复性佳
注意事项:炎症样本需及时处理,防止蛋白降解,洗板彻底,避免非特异性吸附干扰结果
关键注意事项:

本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
实验步骤如下:

试剂盒组分室温放置 28min,稀释洗涤液,梯度稀释 C/EBPδ 标准品,划分酶标板功能孔位并编号。
标准孔加 50μL 梯度标准品,样本孔上 50μL 待测蛋白样本,空白孔加入等量稀释液。
每孔加入 100μL 一步法酶偶联预混液,封板密封,37℃避光孵育 50min。
弃去孔内液体,洗涤液洗板 5 次,浸泡 35s / 次,吸水纸拍干残留液体。
每孔加入 TMB 显色液 100μL,37℃避光显色 14min。
加入 50μL 终止液混匀终止显色。
酶标仪测定吸光度,标准曲线法算出 C/EBPδ 浓度。
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