本试剂盒运用双抗体夹心ELISA技术检测C/EBPε含量,酶标板微孔包被高特异性抗人C/EBPε抗体,孵育时样本中的目标抗原与固相抗体特异性结合,随后加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体形成夹心复合物,充分洗板后进行显色反应,终止后检测吸光度,依托标准曲线精准测定样本中C/EBPε的表达水平。
基本参数:

产品名称:人CCAAT增强子结合蛋白ε(C/EBPε)ELISA试剂盒
英文名称:C/EBPε ELISA Kit
货号:Y-E2625
规格:48T/96T
灵敏度:最低检出限0.16ng/mL,精准检测造血相关转录因子
检测范围:0.5ng/mL - 15ng/mL,适配造血细胞、免疫细胞样本检测
反应时间:全程实验反应105分钟,保障微量转录因子检测精度
保存条件:全套试剂2-8℃避光冷藏,禁止高温存放
有效期:原装未开封有效期9个月,开封后25天内使用完毕
特异性:特异性识别人C/EBPε蛋白,家族亚型区分度高,无交叉反应
重复性:板内CV≤6%,板间CV≤8%,造血相关蛋白检测稳定
注意事项:细胞样本需新鲜提取,避免转录因子失活,实验操作全程无菌无污染
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

试剂室温平衡 33min,稀释浓缩洗涤缓冲液,倍比稀释 C/EBPε 标准品,标记酶标板各类孔位。
标准品孔添加 50μL 梯度标准液,样本孔加入 50μL 预处理待测样本,空白孔补稀释液。
所有孔位加入 100μL 一步法酶标记工作液,封板后 37℃避光孵育 56min。
弃废液,洗涤液浸泡洗板 4 次,每次 40s,彻底拍干酶标板。
每孔加入显色底物 95μL,37℃避光显色 18min。
逐孔添加终止液 50μL,摇晃混匀终止反应。
酶标仪 450nm 读取 OD 值,定量检测 C/EBPε 蛋白水平。
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