本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附原理,酶标板预先包被红螯光壳螯虾卵黄脂磷蛋白/卵黄磷蛋白(Lv/Vn)特异性捕获抗体,待测样本中的Lv/Vn抗原与固相抗体特异性结合,洗涤去除未结合组分后,加入酶标记检测抗体形成免疫夹心复合物,底物显色后的吸光度值与样本中Lv/Vn含量呈正相关,通过标准曲线可定量检测该蛋白的表达含量。
产品参数:
产品名称 | 红螯光壳螯虾卵黄脂磷蛋白/卵黄磷蛋白(Lv/Vn)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E3410 |
英文名称 | Lv/Vn ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测值0.11ng/mL,精准检测螯虾性腺、血清中Lv/Vn微量蛋白。
检测范围:0.22ng/mL - 90ng/mL,覆盖螯虾繁殖周期内蛋白表达浓度变化区间。
反应时间:总实验时长95分钟,水产无脊椎动物样本专属孵育45分钟,显色20分钟。
保存条件:2-8℃避光冷藏保存,蛋白抗体组分密封防潮,防止降解。
有效期:未拆封有效期11个月。
特异性:特异性结合红螯光壳螯虾Lv/Vn,与其他虾类卵黄蛋白无交叉反应。
重复性:板内CV≤5%,板间CV≤7%,水产繁殖生理实验数据一致性高。
注意事项:螯虾样本需新鲜解剖提取,水体杂质、组织碎屑需彻底清除。
试剂盒组成:
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
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实验操作流程:
试剂盒室温平衡 30min,稀释浓缩洗涤液,拆分微孔板条,多余板条密封冷藏避光保存。
Lv/Vn 标准品梯度稀释,螯虾卵巢组织匀浆上清稀释过滤,每孔加 50μL 样本或标准稀释液。
一步添加酶标特异性抗体 100μL,封板膜密封酶标板孔口。
37℃避光孵育 65min,固相载体捕获目标蛋白形成免疫复合物。
洗板 5 次,每次注满洗涤液静置 32s,倒扣板条拍干废液。
避光滴加显色 A 液、B 液各 50μL,轻微震荡混匀,37℃显色 16min。
终止液终止显色反应,酶标仪 450nm 测定吸光度,根据标准曲线计算 Lv/Vn 蛋白含量。
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