本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，固相载体酶标板包被有抗人D-LDH特异性抗体，加入标准品与待测生物样本后，样本中的D-乳酸脱氢酶与固相抗体特异性结合，洗除未结合杂质后，加入HRP标记的D-LDH检测抗体，形成特异性免疫复合物，经底物显色、终止反应后，通过酶标仪检测吸光度，对照标准曲线定量测定样本中D-LDH的活性及含量。
基本参数：
产品名称：人D-乳酸脱氢酶(D-LDH) ELISA试剂盒
英文名称：D-LDH Elisa Kit
货号：Y-E916
规格：48T/96T
灵敏度：最低检测活性0.5U/L，可精准检测体液中微量酶活性
检测范围：1U/L - 60U/L，适配肠道损伤、代谢紊乱相关样本检测
反应时间：全流程反应时长85分钟，酶促反应速率稳定
保存条件：2-8℃避光密封保存，酶试剂组分需单独妥善存放，避免失活
有效期：标准储存条件下有效期12个月
特异性：专一检测人D-乳酸脱氢酶，不与L-乳酸脱氢酶发生交叉反应
重复性：板内变异＜6%，板间变异＜8%，酶活性检测重复性良好
注意事项：样本采集后需低温静置，避免酶活性失活；实验全程避免剧烈震荡，防止酶蛋白变性
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：
试剂室温放置 28min，配制洗涤液；D-LDH 标准品稀释配制梯度浓度，待测样本离心去除杂质沉淀。
酶标板设孔，标准品与样本孔分别加液 100μL，空白孔加入等量样本稀释液。
所有孔一次性加入酶结合检测液 100μL，轻柔混匀后封板包裹。
37℃恒温孵育 50min，全程避光操作。
洗板操作：弃废液，洗涤液浸泡 30s 拍干，重复 4 次洗板，吸干微孔残留液体。
加入底物显色液 100μL，室温遮光显色 13min。
终止液终止反应，酶标仪 450nm 读值，换算样本 D-LDH 酶活性浓度。
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