本试剂盒采用间接法酶联免疫检测原理,以包被于酶标板的EB病毒特异性抗原为固相载体,加入待测血清样本,样本内EBv IgM抗体可与固相抗原特异性结合,洗涤去除非特异性结合成分后,加入HRP标记的抗人IgM抗体进行孵育,结合形成抗原-抗体-酶标二抗复合物,经显色、终止反应后检测吸光度,精准检测样本中EBv IgM抗体水平,用于判定EB病毒近期急性感染。
基本参数:

产品名称:人EB病毒IgM(EBv IgM)ELISA试剂盒
英文名称:EBv IgM Elisa Kit
货号:Y-E601
规格:48T/96T
灵敏度:早期感染检出灵敏度≥96%,可捕捉EB病毒急性感染早期IgM抗体
检测范围:0.15AU/mL - 90AU/mL,适配急性感染窗口期样本检测
反应时间:实验总时长140分钟,延长温育时间保障低滴度抗体结合
保存条件:2-8℃低温避光保存,抗体试剂避免反复开合暴露空气
有效期:标准储存条件下有效期12个月
特异性:特异性结合EB病毒IgM抗体,无同类病毒抗体交叉反应,特异性极高
重复性:实验重复准确率≥97%,变异系数<7%
注意事项:类风湿因子阳性样本需预处理,避免假阳性;样本禁止反复冻融,防止抗体降解
实验前准备工作:

1. 试剂平衡与稀释
试剂盒所有组分(酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液)从 2~8℃取出,室温(20~25℃)放置平衡 30min,严禁直接低温操作。
浓缩洗涤液配制:按标签标注比例用去离子纯水稀释(常见 20× 浓缩液:1 份浓缩液 + 19 份纯水),混匀备用,现配现用。
标准品复溶 / 梯度稀释:
冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解,室温静置 10min,轻柔吹打混匀;
按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品,单独标记,剩余原液分装 - 20℃避光保存,避免反复冻融。
待测样本预处理:血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释,浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清;溶血、脂血严重样本弃用。
2. 耗材与设备准备
设备:恒温 37℃孵育箱、酶标仪(450nm 主波长,630nm 参比)、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机(或手动洗板槽)、封板膜、离心管。
耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染,移液枪提前校准。
取出本次实验所需酶标板条,剩余未使用板条装入铝箔密封袋,加干燥剂 2~8℃避光保存。
3. 孔位规划标记
酶标板做好分区标记:空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔(所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差)。
实验步骤如下:

试剂盒所有组分室温放置 35min,稀释浓缩洗涤液;EBv IgM 标准品复溶稀释梯度,待测血清预处理去除脂血杂质。
酶标板设定空白、标品、样本孔,每孔加样 100μL,空白孔补稀释液。
一步法加入辣根过氧化物酶标记抗人 IgM 抗体工作液 100μL,混匀封板。
37℃避光孵育 62min。
洗板 5 次,每次洗涤液浸润 30s 后倒扣拍净孔内液体。
加入显色 A、B 液各 50μL,室温避光显色 16min。
终止液终止显色,酶标仪读数,绘制标准曲线定量 EBv IgM 水平。
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