本试剂盒采用抗体捕获法ELISA检测原理,微孔板固定抗人IgM抗体,特异性捕获样本中的人麻疹病毒IgM抗体,随后加入麻疹病毒抗原和酶标抗体构建免疫复合物,经显色反应后,通过吸光度检测结合标准曲线,定量检测样本中MV IgM抗体含量。
产品参数:
产品名称 | 人麻疹病毒IgM(MV IgM)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E612 |
英文名称 | MV IgM Elisa Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:急性期 IgM 阳性符合率>99%
检测范围:抗体滴度 1:32~1:4096
反应时间:室温避光孵育合计 108min
保存条件:2~8℃避光,洗涤液稀释用水必须为无热源纯水
显色系统:TMB 双组分混合显色
检测波长:450nm,参比 620nm
标准曲线绘制:定值阳性对照血清构建定量参考曲线
注意事项:类风湿因子干扰易造成假阳性,必要时使用吸附剂预处理样本
实验前准备工作:
1. 试剂平衡与稀释
试剂盒所有组分(酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液)从 2~8℃取出,室温(20~25℃)放置平衡 30min,严禁直接低温操作。
浓缩洗涤液配制:按标签标注比例用去离子纯水稀释(常见 20× 浓缩液:1 份浓缩液 + 19 份纯水),混匀备用,现配现用。
标准品复溶 / 梯度稀释:
冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解,室温静置 10min,轻柔吹打混匀;
按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品,单独标记,剩余原液分装 - 20℃避光保存,避免反复冻融。
待测样本预处理:血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释,浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清;溶血、脂血严重样本弃用。
2. 耗材与设备准备
设备:恒温 37℃孵育箱、酶标仪(450nm 主波长,630nm 参比)、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机(或手动洗板槽)、封板膜、离心管。
耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染,移液枪提前校准。
取出本次实验所需酶标板条,剩余未使用板条装入铝箔密封袋,加干燥剂 2~8℃避光保存。
3. 孔位规划标记
酶标板做好分区标记:空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔(所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差)。
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实验操作流程:
样本稀释:血清样本稀释后颠倒试管 5 次混匀;
微孔加样:每孔加入阴阳性对照、待测稀释血清 100μL;
一步免疫结合:直接加入酶标记二抗,封板 37℃孵育 68min;
洗板除杂:洗涤液浸泡 31s,拍干,洗板 5 次;
避光显色:加入 TMB 显色液 17min;
终止操作:滴加终止液终止反应;
检测判定:酶标仪对照 cutoff 值判定麻疹 IgM 抗体阴阳性。
关键字: 人麻疹病毒IgM;MV IgM;ELISA试剂盒;
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