本试剂盒采用双抗体夹心ELISA原理,酶标板微孔包被纯化的人IRAP特异性捕获抗体,加入待测样本与标准品,样本中的ICE蛋白酶激活因子与固相抗体特异性结合,充分洗涤后加入HRP标记的IRAP检测抗体,形成特异性免疫复合物,通过底物显色、酸性终止液终止反应,检测吸光度并对照标准曲线,定量测定样本中IRAP的含量。
基本参数:

产品名称:人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)ELISA试剂盒
英文名称:IRAP ELISA Kit
货号:Y-E2620
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测值0.11ng/mL,适配细胞凋亡、炎症相关蛋白检测
检测范围:0.22ng/mL - 24ng/mL,覆盖细胞凋亡模型样本表达范围
反应时间:实验总时长102分钟
保存条件:2-8℃密封冷藏,酶类试剂避免高温环境
有效期:未开封有效期12个月
特异性:专一结合IRAP蛋白,与其他凋亡蛋白酶无交叉反应
重复性:板内、板间变异系数均<9%
注意事项:样本采集后快速低温处理,抑制蛋白酶降解;洗板彻底,减少背景干扰
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

试剂盒组分室温放置 32min,稀释浓缩洗涤液;IRAP 冻干标准品梯度稀释,待测上清样本预处理。
预包被板各孔加入标准品、待测样本 100μL,空白孔添加稀释液。
一步加入 HRP 标记抗体工作液 100μL,混匀封板。
37℃恒温孵育 68min。
洗板 5 次,每孔洗液浸泡 35s 后倒扣拍净。
显色液 A、B 配比添加,避光显色 17min。
终止反应后检测吸光度,换算样本 IRAP 蛋白含量。
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