本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理,微孔板包被纯化的抗人APAF1特异性抗体,能够特异性结合标准品及待测样本中的APAF1抗原,孵育充分反应后洗涤去除孔内游离杂质,加入HRP标记的APAF1二抗形成免疫夹心复合物,底物催化显色后用终止液终止反应,酶标仪检测各孔OD值,根据标准曲线计算出待测样本中APAF1的精准浓度。
产品参数:
产品名称 | 人衔接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E2966 |
英文名称 | APAF1 ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:0.06ng/mL
检测范围:0.1-6.4ng/mL
反应时间:37℃孵育 68min,酶标抗体 42min,显色 9min
保存条件:未开启 2-8℃长期保存;浓缩试剂稀释后 4℃可存 7 天
显色系统:即用型单一显色液,操作步骤简化
检测波长:450nm 直接读数
标准曲线绘制:半对数坐标构建标准曲线,计算样本原始浓度
注意事项:凋亡样本中 APAF1 易降解,取样后立即置于冰上裂解处理
关键注意事项:
本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
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实验操作流程:
试剂盒室温平衡 35min,配制一步法抗原 - 酶混合液,标记实验孔类型。
每孔先加注酶复合液 60μL,标品孔加梯度 APAF1 标准品 40μL,样品孔加预处理样本 40μL,空白孔加稀释液 40μL。
封板 37℃孵育 59min,倾倒废液,洗板 4 次,每次浸泡 27s,拍干微孔板。
每孔加入 TMB 显色底物 100μL,水平摇晃混匀。
室温避光显色 12min。
快速加入终止液 50μL 终止显色。
450nm 读取吸光值,标准曲线换算 APAF1 含量。
关键字: 人衔接蛋白酶活化因子1;APAF1;ELISA试剂盒;
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