罗氏沼虾诺达病毒(MrNV)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板预先包被罗氏沼虾诺达病毒（MrNV）特异性抗体，待测样本中的病毒抗原与固相抗体特异性结合，洗板后加入辣根过氧化物酶标记的病毒特异性检测抗体，形成固相抗体-病毒抗原-酶标抗体免疫复合物，底物显色后的吸光度值与样本中MrNV病毒含量正相关，可精准定量检测该病毒的载量水平。
产品参数：

‌灵敏度：最低病毒检出效价1:90，可早期检测罗氏沼虾隐性MrNV病毒感染。

检测范围：适配虾类组织、血清样本中MrNV病毒抗原定量检测，覆盖轻症、重症感染浓度区间。

反应时间：总实验时长100分钟，水产病毒样本孵育45分钟，显色稳定25分钟。

保存条件：2-8℃避光密封保存，病毒检测试剂严禁冷冻、暴晒。

有效期：原装未开封有效期12个月。

特异性：仅特异性识别罗氏沼虾诺达病毒，与虾类其他病毒无交叉反应。

重复性：板内CV≤6%，板间CV≤8%，水产疫病检测数据可靠。

注意事项：病虾样本需新鲜采集，腐烂样本会导致非特异性显色，出现假阳性。
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

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实验操作流程：

试剂盒室温平衡 35min，稀释洗涤液，设置阴阳性对照孔、标准孔与样本孔。

罗氏沼虾组织研磨上清稀释处理，梯度稀释病毒标准品，每孔加 50μL 液体样本。

所有孔直接加入酶标记抗体工作液 100μL，封板膜严密密封酶标板。

37℃避光孵育 66min，固相抗体结合病毒抗原与酶标二抗。

洗板 6 次，每次洗涤液浸泡 31s，拍净微孔内废液。

避光添加显色底物液，每孔 100μL，37℃避光显色 17min。

终止液终止显色，酶标仪 450nm 测 OD 值，结合对照判定病毒阳性并定量病毒载量。