本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理,酶标板微孔包被抗人Podocin特异性抗体,加入标准品及待测肾组织、血清样本,样本中的Podocin足细胞蛋白与固相抗体特异性结合,孵育洗涤后加入HRP标记的Podocin检测抗体,形成稳定的免疫夹心复合物,经显色、终止反应后检测OD值,定量检测样本中Podocin蛋白含量,评估肾小球足细胞损伤程度。
基本参数:

产品名称:人PodocinELISA试剂盒
英文名称:Humanpodocin Elisa Kit
货号:Y-E3126
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测值0.11ng/mL,适配肾小球损伤蛋白微量检测
检测范围:0.22ng/mL - 24ng/mL,覆盖肾病、肾小球病变样本表达区间
反应时间:实验总时长95分钟
保存条件:2-8℃密封避光保存,包被板防潮存放
有效期:未开封有效期12个月
特异性:特异性识别人Podocin足细胞蛋白,无肾脏同源蛋白交叉反应
重复性:板内变异<7%,板间变异<8%
注意事项:尿液、肾组织样本规范预处理;避免杂质吸附影响显色结果
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

实验前 30min 取出试剂盒置于室温,稀释浓缩洗涤缓冲液,溶解冻干标准品并进行梯度稀释,规划酶标板排布。
空白对照孔添加样本稀释液,标准孔加入不同浓度标准品溶液,样本孔加入预处理后的待测上清样本,规范加样。
直接向全部微孔加入酶标记一抗工作液,轻轻震荡酶标板使孔内体系混匀,封板膜封口。
37℃恒温孵育 60min,全程避光,不可中途开盖查看。
撕掉封板膜,倒扣去除废液,每孔加满洗涤液静置 30s 后甩干,重复洗板 5 次,吸水纸拍干。
每孔加入显色 A 液、B 液,避光条件下显色 14min,出现清晰颜色梯度即可。
加入终止液终止反应,10min 内在 450nm 波长下测 OD 值,计算 Podocin 蛋白样本浓度。
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