本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理,将抗人H-ras特异性抗体包被于酶标板微孔,加入标准品、细胞裂解液、血清等待测样本,样本中的H-ras蛋白与固相抗体特异性结合,孵育洗涤后加入HRP标记的H-ras检测抗体,形成夹心式免疫复合物,经底物显色、终止反应后检测吸光度,定量检测样本中H-ras蛋白的表达水平。
基本参数:

产品名称:人H-ras ELISA试剂盒
英文名称:H-ras Elisa Kit
货号:Y-E266
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测灵敏度0.1ng/mL,适配肿瘤致癌蛋白微量检测
检测范围:0.2ng/mL - 20ng/mL,覆盖肿瘤突变、正常组织表达区间
反应时间:全流程实验时长88分钟
保存条件:2-8℃避光保存,各试剂组分分类存放
有效期:标准储存有效期12个月
特异性:特异性识别人H-ras蛋白,与K-ras、N-ras无交叉反应
重复性:板内变异<6%,板间变异<7%
注意事项:样本需低温保存,防止癌蛋白降解;实验温育温度恒定,保证结合效率
关键注意事项:

本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
实验步骤如下:

试剂室温回温 30min,配制洗涤缓冲液;H-ras 标准品倍比稀释,细胞裂解样本离心去除沉淀杂质。
酶标板设定孔位,每孔加样 100μL,空白孔补稀释液。
所有孔一次性加入酶偶联检测抗体 100μL,轻柔混匀后封板密封。
37℃避光孵育 60min。
弃液洗板 5 次,每次洗涤静置 30s,充分拍干微孔。
加入显色底物避光显色 16min。
终止显色,酶标仪 450nm 测定 OD 值,绘制标准曲线计算 H-ras 浓度。
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