本试剂盒采用竞争酶联免疫吸附试验原理,利用固相载体包被特异性抗体,样本中的牛丙酮与固相抗体发生特异性结合竞争反应,通过加入酶标记物、底物显色,样本中牛丙酮含量与显色深浅呈负相关,依据标准品浓度对应的吸光度值,即可精准计算样本中牛丙酮的含量。
产品参数:
产品名称 | 牛丙酮检测(acetone)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E3449 |
英文名称 | Bovine acetone ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测浓度可达0.1mmol/L,可精准识别样本中微量丙酮含量,无假阴性检出情况
检测范围:0.2mmol/L - 10mmol/L,覆盖牛血清、组织液、乳汁中丙酮常规检测浓度区间
反应时间:整体实验操作时长90分钟,包含样本孵育、洗板、显色、终止全流程
保存条件:试剂盒未开封状态2-8℃冷藏保存,严禁冷冻;开封后板条密封置于2-8℃存放
有效期:未开封原装试剂盒有效期6个月,严格按储存条件存放可保障性能稳定
特异性:仅特异性识别牛丙酮分子,与牛体内乳酸、乙酸、葡萄糖等常见代谢物无交叉反应
重复性:板内变异系数CV≤6%,板间变异系数CV≤8%,实验重复性良好
注意事项:样本需避免溶血、脂血,溶血样本会干扰显色反应;实验全程使用无酶无菌耗材,洗板需彻底,避免非特异性吸附影响结果;试剂使用前需平衡至室温,禁止高温加热试剂。
关键注意事项:
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
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实验操作流程:
提前将试剂盒所有组分置于室温环境平衡 30min,配制洗涤工作液、样本稀释液,取出酶标板预留所需孔位,剩余板条密封冷藏保存。
设置空白对照孔、标准品梯度孔、待测样本孔,每孔依次加入对应梯度浓度标准品、稀释后待测样本,空白孔仅加样本稀释液,每孔加样量严格统一。
一步法直接向所有孔内同步加入酶结合工作液,轻轻震荡酶标板混匀孔内液体,覆膜封板避免液体蒸发与交叉污染。
恒温孵育箱 37℃避光孵育 60min,期间禁止挪动酶标板,防止孔内反应体系晃动影响抗原抗体结合效率。
揭去封板膜,快速弃去孔内全部反应液,每孔加满洗涤洗涤液浸泡 30s 后拍干,重复洗板 5 次,最后一次彻底拍净孔内残留液体。
每孔精准加入显色底物 A 液与 B 液,避光室温显色 15min,肉眼观察标准品孔呈现清晰梯度蓝色即为显色正常。
每孔加入终止液终止酶促显色反应,轻板混匀,15min 内使用酶标仪设定对应波长读取各孔 OD 值,绘制标准曲线计算样本丙酮浓度。
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