本试剂盒采用双抗体夹心ELISA原理,微孔板包被苏云金芽孢杆菌蛋白(BT)特异性抗体,样本中的BT蛋白与固相抗体特异性结合,结合酶标检测抗体形成免疫复合物,经显色、终止步骤后,检测吸光度,其数值与样本中BT蛋白含量成正比,通过标准曲线可精准定量样本中BT蛋白浓度。
产品参数:
产品名称 | 苏云金芽孢杆菌蛋白(BT)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E3448 |
英文名称 | BT ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测限0.02ng/mL,可精准检出样本中微量BT杀虫蛋白残留
检测范围:0.04ng/mL - 30ng/mL,适配作物、土壤、植株组织样本检测
反应时间:全流程100分钟,适配微生物蛋白抗原抗体结合特性
保存条件:2-8℃冷藏保存,严禁冷冻,试剂开封后1个月内用完
有效期:原装未开封有效期12个月,储存稳定无活性衰减
特异性:专一识别苏云金芽孢杆菌BT蛋白,与其他芽孢杆菌蛋白、植物内源蛋白无交叉反应
重复性:板内CV≤5%,板间CV≤7%,批次检测一致性良好
注意事项:土壤、作物样本需充分研磨、离心纯化,去除杂质干扰;实验耗材无蛋白污染,避免非特异性吸附;结果检测需在显色终止后15分钟内完成。
试剂盒组成:
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
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实验操作流程:
试剂盒组分室温放置 25min,稀释浓缩洗涤液,作物提取待测样本经离心过滤预处理,酶标板划分阴性对照、阳性对照、标准品、样品检测孔。
阴性孔加阴性对照液,阳性孔加 BT 阳性对照,标准孔添加梯度 BT 蛋白标准品,样品孔加入过滤稀释后的待测提取液。
一步法直接加入酶标记 BT 特异性抗体,封板包裹微孔板,轻微震荡混匀孔内反应体系。
37℃避光孵育 50min,完成抗原 - 抗体夹心结合反应。
揭膜弃液,每孔加满洗涤液浸泡 28s,重复洗板 4 次,彻底清除未结合游离酶标抗体。
加入显色底物混合液,37℃避光显色 14min,阳性孔显深蓝色,阴性孔无明显颜色。
加入终止液终止显色,混匀后酶标仪读数,对照阈值判定样本 BT 蛋白阳性 / 阴性及含量。
关键字: 苏云金芽孢杆菌蛋白;BT;ELISA试剂盒;
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