人TH糖蛋白(THP)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验原理，预先将人TH糖蛋白（THP）特异性捕获抗体包被于微孔板固相载体上，孵育时样本、标准品中的THP可与固相抗体特异性结合，洗涤去除未结合杂质后，加入HRP标记的检测抗体形成固相抗体-抗原-酶标抗体免疫复合物，再次洗涤洗去游离酶标抗体，加入底物液经酶催化发生显色反应，最后加入终止液终止反应，通过酶标仪测定吸光度值，吸光度高低与样本中THP含量呈正相关，以此定量检测样本中THP的浓度。
基本参数‌：

产品名称：人TH糖蛋白(THP)ELISA试剂盒

英文名称：THP Elisa Kit
货号：Y-E3132

规格：48T/96T

1.灵敏度：最低检出量≤1.5ng/mL

2.检测范围：3.125ng/mL - 100ng/mL

3.反应时间：样本孵育 60min，二抗孵育 30min，底物显色 15min

4.显色系统：TMB 单组分显色液

5.检测波长：450nm（参比 630nm）

6.特异性：仅与人 THP 发生特异性结合，与同源蛋白无交叉反应

7.重复性：板内 CV＜7%，板间 CV＜10%

8.注意事项：试剂盒开封后 7 日内用完，避免反复冻融标准品，底物避光保存
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

1. 提前将试剂盒所有试剂、待测样本从冷藏环境取出，室温放置 30min 充分回温；配制洗涤工作液，浓缩洗涤液按说明书比例用纯水稀释混匀备用。

2. 设置空白孔、标准品孔、待测样本孔，每孔加入对应稀释好的标准品、待测样本各 50μL，空白孔不加液体。

3. 除空白孔外，所有孔内即刻加入酶标记结合物工作液 100μL，轻轻晃动酶标板混匀，封板膜密封酶标板。

4. 37℃恒温孵育 60min，期间避免酶标板堆叠、温度大幅波动。

5. 揭去封板膜，弃去孔内液体，每孔加满洗涤液浸泡 30s 后甩干，重复洗板 5 次，最后一次拍净孔内残留液体。

6. 每孔依次加入显色液 A 液、显色液 B 液各 50μL，轻柔震荡混匀，避光 37℃显色 15min。

7. 每孔加入终止液 50μL 终止显色反应，15min 内使用酶标仪在对应波长读取各孔 OD 值，对照标准曲线计算样本 THP 浓度。
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