本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测原理,微孔板固相表面包被有人Toll样受体2(TLR2)特异性单克隆抗体,加入待测样本与标准品后,其中的TLR2抗原与固相抗体特异性免疫结合,洗板去除未结合组分后,加入辣根过氧化物酶标记的TLR2检测抗体,形成稳定的夹心式免疫复合物,经充分洗涤去除多余酶标抗体,加入显色底物催化显色,终止反应后测定吸光度,样本吸光度值与TLR2含量成正比,可精准定量样本中TLR2的表达水平。
基本参数:

产品名称:人toll样受体2(TLR2)ELISA试剂盒
英文名称:TLR2 ELISA Kit
货号:Y-E2952
规格:48T/96T
1.灵敏度:最低检出限≤8pg/mL
2.检测范围:15.6pg/mL - 500pg/mL
3.反应时间:一抗结合 90min,酶标二抗 45min,避光显色 20min
4.显色系统:双组份 TMB 显色试剂 A 液 + B 液
5.检测波长:450nm,可选 600nm 校正背景
6.特异性:靶向人 TLR2 胞外结构域,不识别 TLR4、TLR6 等同家族受体
7.重复性:批内变异系数≤6.5%,批间变异系数≤9.5%
8.注意事项:血清样本需室温静置凝血,溶血样本直接弃用,终止液具有腐蚀性
关键注意事项:

本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
实验步骤如下:

1. 试剂盒组分室温平衡 25min,浓缩洗涤液用去离子水稀释配制成工作洗涤液,充分搅拌无结晶残留。
2. 酶标板分设空白孔、梯度标准品孔、待测样品孔,标准品孔加入梯度稀释标准品 50μL,样品孔加入预处理后待测血清 / 上清 50μL,空白孔空置。
3. 全部非空白孔添加辣根过氧化物酶标记抗体工作液 100μL,覆膜封严板孔,水平轻晃板体使液体混合均匀。
4. 置于 37℃孵育箱避光温育 45min,禁止中途开盖挪动酶标板。
5. 撕掉封板膜,倒扣弃液,每孔注满洗涤液静置 25s 后拍干,连续洗板 4 次,滤纸吸干板底水珠。
6. 每孔分别加注显色底物 A、B 液各 50μL,避光条件下 37℃反应 12min,观察孔内出现蓝色渐变即可。
7. 快速加入终止液每孔 50μL,液体由蓝变黄后立即上机检测吸光度,依托标准曲线换算样本 TLR2 含量。
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