本试剂盒依托双抗体夹心ELISA检测原理，将人TALLA-1/CD231特异性捕获抗体包被于微孔板表面，加入待测样本与标准品后，其中的TALLA-1抗原与固相抗体特异性结合，洗涤去除残留杂质后，加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体，形成稳定的夹心免疫复合物，经洗涤纯化后进行酶促底物显色，终止反应后检测吸光度，吸光度与样本中TALLA-1含量呈正相关，实现定量检测。
基本参数：
产品名称：人T细胞急性淋巴母细胞白血病相关抗原(TALLA-1/CD231)ELISA试剂盒
英文名称：TALLA-1 Elisa Kit
货号：Y-E240
规格：48T/96T
1.灵敏度：检出限≤12pg/mL
2.检测范围：25pg/mL - 800pg/mL
3.反应时间：样本孵育 100min，酶标抗体 55min，显色 22min
4.显色系统：单瓶预混 TMB 显色液
5.检测波长：450nm+620nm 双波长测定
6.特异性：特异性识别人 CD231 膜抗原，与造血系其他分化抗原无交叉
7.重复性：批内 CV≤8%，批间 CV≤11%
8.注意事项：试剂盒 2-8℃避光储存，禁止冷冻，微孔板拆封后防潮密封
通用注意事项：
样本要求
血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。
温度控制
孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。
避光操作
TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。
洗板规范
洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。
污染防控
实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。
安全防护
终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。
失效判定
试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。
稀释校正
样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。
空白对照
空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。
储存禁忌
试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：
1. 试剂盒全部组分室温回温 32min，浓缩洗涤液稀释为工作液，冻干标准品用配套稀释液充分溶解后梯度稀释。
2. 酶标板标记孔位，标准孔加入不同浓度标准品 50μL，样本孔加入预处理待测样本 50μL，空白孔空置。
3. 非空白孔每孔加入酶结合物溶液 100μL，覆膜封板，缓慢晃动酶标板混匀液体。
4. 37℃避光孵育 65min，孵育箱内无其他热源干扰温度。
5. 揭膜弃液，洗涤液加满每孔静置 32s 后拍干，重复洗板 6 次，最大限度洗去非特异性结合物。
6. 避光操作加入显色底物 A、B 液各 50μL，混匀后 37℃避光显色 13min。
7. 加入终止液终止反应，即刻使用酶标仪读取 OD 值，对照标准曲线得出 TALLA-1 抗原含量。
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