本试剂盒基于经典双抗体夹心ELISA技术,微孔板预先固定人T细胞特异性鸟苷三磷酸酶(Tgtp)特异性捕获抗体,孵育时样本中的Tgtp抗原与固相抗体特异性结合,洗涤去除未结合杂质后,加入辣根过氧化物酶标记的Tgtp检测抗体,形成特异性免疫夹心结构,洗涤去除游离酶标抗体后,加入底物催化显色,终止反应后检测吸光度,显色强度与样本中Tgtp浓度成正比,以此完成定量检测。
基本参数:

产品名称:人T细胞特异性鸟苷三磷酸酶(Tgtp)ELISA试剂盒
英文名称:Tgtp Elisa Kit
货号:Y-E914
规格:48T/96T
1.灵敏度:检出下限≤0.8ng/mL
2.检测范围:1.6ng/mL - 51.2ng/mL
3.反应时间:温育 95min,酶结合物 48min,显色 20min
4.显色系统:即用型 TMB 显色底物
5.检测波长:450nm,参比 630nm
6.特异性:专一识别人 Tgtp,与其他 GTP 酶家族蛋白无交叉反应
7.重复性:批内 CV≤7.5%,批间 CV≤10.5%
8.注意事项:终止液为稀硫酸,避免接触皮肤与衣物,废液集中处理
关键注意事项:

本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
实验步骤如下:

1. 试剂盒试剂室温平衡 26min,按比例稀释浓缩洗涤液,冻干标准品复溶后梯度稀释,样本离心去除沉淀杂质。
2. 酶标板分孔标记,标准品孔加稀释标准品 50μL,待测样本孔加上清样本 50μL,空白孔无加样。
3. 实验组每孔加入酶标记结合液 100μL,封板密封,小幅晃动酶标板混匀体系。
4. 37℃避光孵育 50min,避免频繁开关孵育箱造成温度波动。
5. 弃液后洗涤液注满每孔浸泡 26s,甩干重复洗板 4 次,滤纸吸干板底水渍。
6. 避光加入显色液 A、B 各 50μL,混匀后 37℃避光显色 17min。
7. 加入终止液终止显色,10min 内酶标仪读数,拟合标准曲线定量 Tgtp 酶含量。
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